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南京大學證實猴子種系獲得Cas9/RNA介導 的基因修飾

時間:2015/1/15閱讀:778
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南京大學模式動物所證實猴子種系獲得Cas9/RNA介導
的基因修飾

2015年01月12日 瀏覽量: 37 次 評論(0) 來源:南京大學模式動物研究所 作者:南京大學模式動物研究所責任編輯:wlladmin

摘要:南京大學模式動物研究所的黃行許(Xingxu Huang)博士、南京醫(yī)科大學的沙家豪(Jiahao Sha)教授,以及云南省靈長類生物醫(yī)學重點實驗室季維智( Weizhi Ji )等研究人員,在2014年12月23日的《細胞研究》(Cell Research)雜志上發(fā)表Letter文章稱,繼今年他們成功地利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)對孿生食蟹猴進行基因組修飾后,在后續(xù)的研究中他們進一步證實了猴子生殖系細胞獲得了Cas9/RNA介導的基因修飾。

南京大學模式動物研究所的黃行許(Xingxu Huang)博士、南京醫(yī)科大學的沙家豪(Jiahao Sha)教授,以及云南省靈長類生物醫(yī)學重點實驗室季維智( Weizhi Ji )等研究人員,在2014年12月23日的《細胞研究》(Cell Research)雜志上發(fā)表Letter文章稱,繼今年他們成功地利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)對孿生食蟹猴進行基因組修飾后,在后續(xù)的研究中他們進一步證實了猴子生殖系細胞獲得了Cas9/RNA介導的基因修飾。

在猴子中實現(xiàn)基因打靶將大大的推進人類疾病模型的發(fā)展。盡管少量的猴子模型已經(jīng)順利產(chǎn)生,但是大多數(shù)過去使用靈長類做基因打靶的努力都不幸失敗了??芍匦戮幊痰膬?nèi)切核酸酶的方法,例如ZFN(鋅指核酸酶)、TALEN(轉(zhuǎn)錄激活樣效應因子核酸酶)和CRISPR(成簇的規(guī)律間隔性短回文重復序列)/Cas系統(tǒng)為在猴子中實現(xiàn)基因修飾開啟了新途徑。在以上的方法中,CRISPR/Cas9系統(tǒng)被認為是zui有效的基因打靶方法,其已成功應用于多種動物物種中。

他們zui近的研究報告稱已在猴子上成功利用CRISPR/Cas9在猴子中介導了的基因打靶,Cas9核酸酶利用一個小型的導向RMA通過堿基配對被定向到一個特殊的基因位點。通過顯微注射cas9 mRNA和靶向 3種sgRNAs基因NR0B1(細胞核受體亞科0 b組成員1)、PPAR-γ(過氧化物酶體增殖物活性受體γ)、和RAG1(重組活化基因1)進入單細胞胚胎,他們在29只代孕食蟹猴中建立了10例妊娠。*組足月孿生猴被證實攜帶了Ppar-γ和Rag1靶基因突變,并且未檢測到任何的脫靶效應。隨后他們利用TALEN也在猴子中成功進行了基因組操控。這些成果證明了在猴子中實現(xiàn)基因打靶的可行性。

然而,要建立遺傳上的改良猴子種群基因修飾的種系傳遞*。盡管以往有研究報告稱在猴子中成功實現(xiàn)了轉(zhuǎn)基因的種系傳遞,但對于CRISPR/Cas9在猴子中介導的基因組編輯能否傳遞至下一代仍有待確定。在這項研究中,他們著手檢測性腺和生殖細胞的基因靶效應從而探索種系傳遞是否可能在Cas9處理的猴子中發(fā)生。
  在這篇文章中作者們報告稱,他們在后續(xù)的研究中進一步證實了利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)在猴子中實現(xiàn)基因編輯的可行性。此外,他們的數(shù)據(jù)證實了Cas9介導的誘變廣泛存在于各種體細胞組織和生殖腺中。更為重要的是,他們的研究在群體和單細胞水平上提供了重要的證據(jù)證實,Cas9介導的基因修飾存在于猴子的生殖系細胞中,且這些修飾極有可能通過猴子的生殖系細胞傳遞給下一代。雖然如此,作者們表示有關(guān)種系傳遞的直接證據(jù)還有待進一步獲取。

此文轉(zhuǎn)發(fā)自:中國實驗動物信息網(wǎng) 

來源:南京大學模式動物研究所 作者:南京大學模式動物研究所

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