苯甲酸、山梨酸和糖精鈉是常用的食品添加劑。食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測(cè)定有氣相色譜法(GC)、薄層色譜法(TLC)和液相色譜法(HPLC);糖精鈉的測(cè)定有GC 法、TLC 法和離子選擇電極法(ISE)(1)。TLC 法操作復(fù)雜,僅可半定量分析;ISE 法需特殊設(shè)備;HPLC 法可同時(shí)測(cè)定食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉。具有方法簡(jiǎn)便,靈敏度高,選擇性好,線性范圍寬等優(yōu)點(diǎn)。
1. 材料與方法
1.1 儀器與試劑
儀器 STI5000 液相色譜儀,紫外檢測(cè)器(上海禾工科學(xué)儀器有限公司);在線脫氣機(jī)。
試劑
1. 甲醇(CH3OH) 色譜純;
2. 乙酸銨(NH4Ac) A.R.;
3. 苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(1.0mg/mL) 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心;
4. 山梨酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(1.0mg/mL) 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心;
5. 糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(1.0mg/mL) 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心;
6. 純水 。
1.2 色譜條件
檢測(cè)器 UV-Vis,λ=230nm;
色譜柱 C18,250mm×4.6mm,5μm;
流動(dòng)相 0.02mol/L 乙酸銨-甲醇=(95+5);
流 速 1.0mL/min;
進(jìn)樣量 20μL;
柱 溫 室溫。
1.3 方法
在上述色譜條件下,注入20μL 苯甲酸、山梨酸和糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)混合液(0.04、0.02、0.04μg/μL)。色譜圖見(jiàn)圖1
2. 結(jié)果與討論
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制
苯甲酸、山梨酸、糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)混合液的配制。吸取苯甲酸、山梨酸、糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,配制濃度分別為0.0 1、0.02、0.04、0.06、0.08、0.10μg/μL 的標(biāo)準(zhǔn)混和液。按上述色譜條件測(cè)定基線構(gòu)成之面積稱峰面積。A=×σ×h=2.507σh=1.064 Wh/2h>峰面積,并繪制校正曲線。
3. 結(jié)論
液相色譜儀測(cè)定食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉,具有靈敏度高、結(jié)果準(zhǔn)確、精密度和線性關(guān)系良好等特點(diǎn)。適用于食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉含量的測(cè)定。
參考文獻(xiàn) 1. 中華人民共和國(guó)食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)法.GB/T5009.28-2003;GB/T5009.29-2003
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