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艱難梭菌|4分鐘生成嚴(yán)格培養(yǎng)環(huán)境，City不City？
閱讀：167 發(fā)布時(shí)間：2024-8-1艱難梭菌（Clostridium difficile，CD）是一種產(chǎn)毒素的專性厭氧革蘭陽(yáng)性芽孢菌，廣泛分布于人和動(dòng)物的腸道及環(huán)境中。因其對(duì)氧極為敏感，在傳統(tǒng)培養(yǎng)基上分離培養(yǎng)較困難，故命名為艱難梭菌。
在過去的十年里，艱難梭菌感染的頻率和嚴(yán)重程度在世界范圍內(nèi)不斷增加，成為引起抗生素相關(guān)性腹瀉和院內(nèi)感染的主要病原菌之一。2013年和2019年美國(guó)CDC《抗生素耐藥威脅報(bào)告》將艱難擬梭菌列為緊急威脅的耐藥菌。
艱難梭菌感染的危險(xiǎn)因素：
·抗生素使用(2-3月使用以上)
·住院(2-3個(gè)月長(zhǎng)期住院)
·高齡(＞65歲)
·鼻飼管和胃腸道治療
·胃酸抑制藥物-質(zhì)子泵抑制劑和組胺2(H2)受體拮抗劑
·免疫抑制狀態(tài)
·炎癥性腸病
·胃腸道手術(shù)
近年來(lái)，我國(guó)部分地區(qū)已檢測(cè)出高毒力株，表明艱難梭菌感染(Clostridium difficile infection,CDI)已對(duì)我國(guó)臨床構(gòu)成了威脅。同時(shí)，研究表明我國(guó)的CDI分子流行病學(xué)特征具有自身特點(diǎn)，使得CDI的防控形勢(shì)十分嚴(yán)峻。因此，臨床快速、準(zhǔn)確診斷CDI，對(duì)改善患者預(yù)后及節(jié)省我國(guó)醫(yī)療支出具有重要意義。
2017年我國(guó)發(fā)布了《中國(guó)成人艱難梭菌感染診斷和治療專家共識(shí)》，將艱難梭菌感染診斷標(biāo)準(zhǔn)更新為：患者出現(xiàn)中至重度腹瀉或腸梗阻，并滿足以下任一條件：（1）糞便檢測(cè)CD毒素或產(chǎn)毒型CD結(jié)果陽(yáng)性；（2）內(nèi)鏡下或組織病理檢查顯示偽膜性腸炎。
目前，艱難梭菌的檢測(cè)方法可分為實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)和臨床診斷策略。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)主要為菌株檢測(cè)、毒素的核酸檢測(cè)和毒性檢測(cè)。
菌株檢測(cè)中，厭氧培養(yǎng)法費(fèi)用較低、操作簡(jiǎn)單，但仍需生物化學(xué)反應(yīng)鑒定且無(wú)法判定是否為產(chǎn)毒株，因此后續(xù)可通過PCR法或MALDI-TOF MS兩種技術(shù)對(duì)典型的艱難梭菌菌落進(jìn)行鑒定。
2019年發(fā)布的《MALDI - TOF MS在臨床微生物鑒定中的標(biāo)準(zhǔn)化操作專家共識(shí)》為臨床微生物的高效鑒定提供了規(guī)范性指導(dǎo)。目前，國(guó)內(nèi)已有實(shí)驗(yàn)室使用MALDI-TOF MS技術(shù)對(duì)經(jīng)培養(yǎng)法獲得的艱難梭菌疑似菌株進(jìn)行準(zhǔn)確鑒定，提升了臨床實(shí)驗(yàn)室鑒定艱難梭菌的水平及效率。
雖然目前艱難梭菌的檢測(cè)方法有多種，但糞便培養(yǎng)仍然是艱難梭菌檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)。在得到純培養(yǎng)的菌株后，后續(xù)還對(duì)培養(yǎng)后的菌株進(jìn)行毒素分型、分子分型，并檢測(cè)其耐藥性，方便臨床根據(jù)耐藥性結(jié)果給患者對(duì)癥下藥，減少抗生素濫用風(fēng)險(xiǎn)。除此之外，還能夠研究其傳播能力（如芽孢形成、黏附能力等）與傳播進(jìn)化機(jī)制，預(yù)防疾病的傳播。
《艱難梭菌感染診斷（T/CPMA 008-2020）》
在艱難梭菌糞便培養(yǎng)培養(yǎng)時(shí)，需要先使用無(wú)水乙醇對(duì)糞便進(jìn)行前處理，然后使用特殊的培養(yǎng)基CCFA或CDMN，嚴(yán)格厭氧培養(yǎng)48-72h。
傳統(tǒng)培養(yǎng)方法：采用厭氧產(chǎn)氣袋培養(yǎng)。但由于產(chǎn)氣袋生成厭氧環(huán)境時(shí)間較長(zhǎng)（40分鐘以上），細(xì)菌暴露在有氧環(huán)境中的時(shí)間較長(zhǎng)，導(dǎo)致艱難梭菌檢出率偏低。
最新培養(yǎng)方案：如今用戶可選擇采用智能厭氧微生物培養(yǎng)系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)更加嚴(yán)格的厭氧培養(yǎng)環(huán)境。例如，浙江省疾病預(yù)防控制中心，配合采用了DW-100A-K智能厭氧微生物培養(yǎng)系統(tǒng)，厭氧環(huán)境的生成時(shí)間大幅縮短，避免樣本長(zhǎng)時(shí)間暴露在有氧環(huán)境中，且生成氣體環(huán)境嚴(yán)格，大大提高了艱難梭菌檢出率。
DW-100A-K系列 智能厭氧微生物培養(yǎng)系統(tǒng)
儀器服務(wù)于各類厭氧菌微需氧菌和嗜二氧化碳菌的培養(yǎng)、檢驗(yàn)，可根據(jù)需要選擇特定氧氣濃度（0%-15%可選）和CO2濃度（5%-15%可選）。儀器能快速生成環(huán)境，微需氧最快約2 min，厭氧最快約4 min，儀器穩(wěn)定可靠，確保重現(xiàn)性100%。
設(shè)備自帶五級(jí)自檢質(zhì)控（氣體輸入氣壓檢測(cè)、罐體連接性檢測(cè)、罐體泄漏性檢測(cè)、罐體密封性檢測(cè)、催化劑活性檢測(cè)），確保培養(yǎng)罐氣密性，嚴(yán)格保障厭氧環(huán)境。
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：
1、一機(jī)多用：厭氧、微需氧和嗜CO2培養(yǎng)；
2、快速生成環(huán)境：微需氧、CO2最快2 min，厭氧最快4 min；
3、脫機(jī)培養(yǎng)：培養(yǎng)罐可從儀器上卸載、獨(dú)立控制，設(shè)置不同培養(yǎng)環(huán)境，培養(yǎng)過程密封，避免樣本泄漏；
4、罐體靈活配置：多種罐體可選，滿足不同培養(yǎng)需求；
5、QA質(zhì)控軟件：培養(yǎng)前5級(jí)質(zhì)控檢測(cè)，確保重現(xiàn)性100%。
