化工儀器網(wǎng)
技術(shù)文章
開學(xué)季討論:牛血清實(shí)驗(yàn)操作步驟與材料需求
閱讀：1329 發(fā)布時(shí)間：2018-9-5牛血清中IgG、IgA、IgM的測定。本試驗(yàn)主要用于檢查血清中各種免疫球蛋白和補(bǔ)體成份的含量。以下為單向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)的具體操作辦法，為需要者提供參考，歡ying來dian咨詢我司產(chǎn)品的具體價(jià)格。
·步驟
1.稀釋參考血清及待檢血清：參考血清用0.5ml蒸餾水溶解后使用，參考血清、待檢血清稀釋按要求進(jìn)行。
2.加樣：將上述稀釋參考血清分別滴入相應(yīng)的抗體免疫板的一排孔內(nèi)，其余孔滴加待檢的稀釋血清，每個(gè)檢樣加兩個(gè)孔，每孔滴加10微升。
3.繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線及血清標(biāo)本中IgG、IgA、IgM定量測定：測量沉淀環(huán)直徑。
這種沉淀環(huán)直徑與抗原含量的關(guān)系不是直線相關(guān)，而是對數(shù)關(guān)系，這種關(guān)系有兩種計(jì)算方
法：
1.Mancini曲線－適用于大分子抗原和長時(shí)間擴(kuò)散的結(jié)果處理。使用方格計(jì)算紙劃線，沉淀環(huán)直徑的平方與抗原濃度呈線性關(guān)系。
2.使用半對數(shù)紙劃線，濃度的對數(shù)與沉淀環(huán)之間呈線性關(guān)系。公式表示：logC/d＝K。
終結(jié)論：免疫球蛋白的含量，不同批號的參考血清其免疫球蛋白含量不一。
·材料需求
IgG、IgA、IgM免疫板、參考血清、待檢血清、微量加樣器、量尺、紗布、生理鹽水、帶蓋方盤。
