聯(lián)系電話
北京鼎國昌盛生物技術(shù)有限責(zé)任公司
中級(jí)會(huì)員·12年
- 聯(lián)系人：
- 譚柳
- 電話：
- 010-62210403
- 手機(jī)：
- 13146220038
- 傳真：
- 86-010-89756821
- 地址：
- 北京昌平區(qū)北七家鎮(zhèn)東沙工業(yè)園384號(hào)
- 個(gè)性化：
- www.dingguocs.com
- 手機(jī)站：
- m.dingguocs.com
- 網(wǎng)址：
- www.dingguocs.com
掃一掃訪問手機(jī)商鋪
韓國科學(xué)家Mohammad Nazrul Islam等先前開發(fā)了一步測(cè)序和無連接酶克隆（SLIC）的方法，它簡單、快速并且成本低。盡管SLIC方法通常作用效果很好，但是有時(shí)候它的克隆效率很低，可能是由于T4 DNA聚合酶室溫處理2.5min時(shí)導(dǎo)致單鏈DNA區(qū)域形成穩(wěn)定的二級(jí)結(jié)構(gòu)。為了克服這個(gè)問題，通過檢測(cè)較短T4 DNA聚合酶在很寬溫度范圍內(nèi)（25℃-75℃）的持續(xù)處理時(shí)間（5s-2.5min），韓國科學(xué)家Mohammad Nazrul Islam等開發(fā)了一種改進(jìn)的熱調(diào)節(jié)SLIC方法。當(dāng)插入的同源片段小于20bp，然后用T4 DNA聚合酶在50度處理30s，這樣的克隆效率zui高。較高的溫度下，這種較短的T4聚合酶幫助增加其兩端插入強(qiáng)二級(jí)結(jié)構(gòu)的DNA的克隆效率，增加短片段克隆的SLIC的效率。
原文：
Optimizing T4 DNA polymerase conditions enhances the efficiency of one-step sequence- and ligation-independent cloning. Mohammad Nazrul Islam, Kyeong Won Lee, Hyung-SoonYim et al. BioTechniques 63:125-130 (September 2017).
