酶標(biāo)板工作原理
酶標(biāo)板(ELISA PLATE):在酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)中,參與免疫學(xué)反應(yīng)的抗原、抗體、標(biāo)記抗體或抗原的純度、濃度和比例;緩沖液種類、濃度和離子強(qiáng)度、pH值和反應(yīng)溫度、時(shí)間等條件起著關(guān)鍵作用。此外,作為載體的固相聚苯乙烯(Polystyrene)表面對(duì)抗原、抗體或抗原抗體復(fù)合物的吸附也起著重要作用。
抗原、抗體和其它生物分子通過(guò)多種機(jī)制吸附至載體表面,這包括通過(guò)疏水鍵、流水/離子鍵的被動(dòng)吸附,通過(guò)引入其它活性基團(tuán)如氨基和碳基的共價(jià)結(jié)合,以及通過(guò)表面改性后的親水鍵結(jié)合。
酶標(biāo)板根據(jù)其孔數(shù)可以分為48孔,96孔。一般常用的為96孔,這要根據(jù)您的酶標(biāo)儀進(jìn)行選擇。另外,又分可拆和不可拆的,對(duì)于不可拆的,就是一整塊板上的板條都是連在一起的,那么可拆的就是板子上面的板條是分開(kāi)的,分出來(lái)的板條又有12孔和8孔之分。一般現(xiàn)在用的較多的是可拆的酶標(biāo)板,如果你之前買了一些這樣的板子,那么現(xiàn)在*可以只買些酶標(biāo)板條就可以了。不同的廠家做出來(lái)的酶標(biāo)板雖然整體看上去是差不多的,但是有些小的細(xì)節(jié)方面會(huì)做的不一樣,比如結(jié)構(gòu)等,這主要是因?yàn)橐浜喜煌笜?biāo)儀使用,因此,當(dāng)你在選擇購(gòu)買酶標(biāo)板時(shí)還要考慮一下你的酶標(biāo)儀是什么樣子。不過(guò)一般都是適配的,只有個(gè)別的會(huì)有所不同。 因?yàn)槊笜?biāo)板的材質(zhì)一般為聚苯乙烯(PS),而聚苯乙烯的化學(xué)穩(wěn)定性較差,可以被多種有機(jī)溶劑(如:芳烴、鹵代烴等)溶解,會(huì)被強(qiáng)酸強(qiáng)堿腐蝕,不抗油脂,在受到紫外光照射后易變色,所以在使用過(guò)程中一定要注意這些。
可以使用已知濃度的某蛋白溶液,在ELISA用的空白聚苯乙烯板上進(jìn)行包被。包被結(jié)束后測(cè)定孔內(nèi)溶液的蛋白濃度,包被前孔內(nèi)蛋白量減去包被后的蛋白量就是吸附在酶標(biāo)板上的蛋白量。這樣就可以知道酶標(biāo)板的吸附性。