熒光光譜儀主要包括光源、激發(fā)單色器、樣品池、熒光單色器及檢測(cè)器等主要部件。

　　1.光源

　　早期的熒光分光光度計(jì)，配有能發(fā)生很窄汞線的低壓汞燈。使用高壓汞燈，譜線被加寬，而且也存在高強(qiáng)度的連續(xù)帶。然而，一個(gè)完整的激發(fā)光譜的測(cè)定需一種能發(fā)射從可見(jiàn)到紫外范圍的較高強(qiáng)度的光輻射的燈。氙弧燈能適于此條件，因此，它是目前在熒光分光光度計(jì)中廣泛使用的光源。

　　2.單色器

　　單色器的作用是把光源發(fā)出的連續(xù)光譜分解成單色光，并能準(zhǔn)確方便地“取出”所需要的某一波長(zhǎng)的光，它是光譜儀的心臟部分。單色器主要由狹縫、色散元件和透鏡系統(tǒng)組成，其中色散元件是關(guān)鍵部件。色散元件是棱鏡和反射光柵或兩者的組合，它能將連續(xù)光譜色散成為單色光。

　　(1)棱鏡單色器

　　棱鏡單色器是利用不同波長(zhǎng)的光在棱鏡內(nèi)折射率不同將復(fù)合光色散為單色光的。棱鏡色散作用的大小與棱鏡制作材料及幾何形狀有關(guān)。常用的棱鏡用玻璃或石英制成。可見(jiàn)分光光度計(jì)可以采用玻，它適用于紫外、可見(jiàn)整個(gè)光譜區(qū)。

　　(2)光柵單色器

　　光柵作為色散元件具有不少*的優(yōu)點(diǎn)。光柵可定義為一系列等寬、等距離的平行狹縫。光柵的色散原理是以光的衍射現(xiàn)象和干涉現(xiàn)象為基礎(chǔ)的。常用的光柵單色器為反射光柵單色器，它又分為平面反射光柵和凹面反射光柵兩種，其中常用的是平面反射光柵。光柵單色器的分辨率比棱鏡單色器分辨率高(可達(dá)±0.2nm)，而且它可用的波長(zhǎng)范圍也比棱鏡單色器寬，且入射光80%的能量在一級(jí)光譜中。近年來(lái)，光柵的刻制復(fù)制技術(shù)也在不斷地改進(jìn)，其質(zhì)量也在不斷的提高，因而其應(yīng)用日益廣泛。

　　(3)狹縫

　　狹縫是單色器的重要組成部分，直接影響到分辨率。狹縫寬度越小，單色性越好，但光強(qiáng)度也隨之減少。

　　3.樣品池

　　熒光儀用的樣品池需用低熒光的材料制成，通常用玻璃和石英材料，形狀以方形和長(zhǎng)方形為宜。

　　4.檢測(cè)器

　　主要有硒光電池、光電管和光電倍增管等。目前來(lái)說(shuō)由于熒光的強(qiáng)度較弱，一般以光電倍增管作檢測(cè)器。選擇光電倍增管要考慮響應(yīng)波長(zhǎng)、靈敏度和噪聲水平等。藍(lán)敏管對(duì)蛋白質(zhì)、核酸的測(cè)量適用，而紅敏管則適用于熒光染料檢測(cè)。

　　熒光光譜儀的主要應(yīng)用

　　(1)在生物領(lǐng)域的應(yīng)用

　　該領(lǐng)域主要用于臨床測(cè)定生物樣品中某些成分的含量，生物技術(shù)及免疫技術(shù)的分析等，如脫氧核糖和脫氧核糖核酸的含量測(cè)定、DNA、抗體、抗原等各方面的研究。在此領(lǐng)域中主要時(shí)利用各種熒光探針進(jìn)行分析檢測(cè)，主要分為生物納米熒光探針和生物非納米熒光探針。

　　其中納米技術(shù)的興起，打開(kāi)了熒光分析的又一個(gè)新的領(lǐng)域。由于納米材料具有很好的熒光性，寬激發(fā)，窄發(fā)射等優(yōu)良的光譜特點(diǎn)，使其成為熒光分析中的重要的研究對(duì)象，引起了研究者的興趣。

　　(2)在食品領(lǐng)域的應(yīng)用

　　該領(lǐng)域主要用于食品中礦物質(zhì)及金屬元素、氨基酸、維生素、菌類(lèi)污染、添加劑、防腐劑、食品包裝有害物質(zhì)、農(nóng)藥殘留等的分析檢測(cè)。特別是與HPLC、TLC、FIA等技術(shù)的結(jié)合可以更好的達(dá)到食品中各種物質(zhì)的檢測(cè)效果。

　　目前我國(guó)食品標(biāo)準(zhǔn)日趨化，對(duì)于食品分析的要求也越來(lái)越趨向于靈敏和微量化。熒光分析正可以滿(mǎn)足這方面的分析要求。

　　(3)在藥物分析中的應(yīng)用

　　藥物分析領(lǐng)域可以利用熒光分析進(jìn)行藥物的有效成分鑒定、藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究、臨床藥理藥效分析等。

　　藥物熒光分析可以分為三類(lèi)：直接熒光分析、間接熒光分析和納米熒光分析。

　　常規(guī)熒光分析法早被應(yīng)用于分析抗瘧疾藥物奎寧，隨著熒光分析法的發(fā)展，其應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大，目前被廣泛用于抗菌素藥物、止痛藥、鎮(zhèn)靜劑、止血藥等的分析。

　　(4)在環(huán)境分析中的應(yīng)用

　　該領(lǐng)域主要利用熒光分析檢測(cè)環(huán)境中的物質(zhì)的含量，主要是對(duì)水體、礦石和土壤進(jìn)行檢測(cè)。隨著有機(jī)化工、石油化工、醫(yī)藥工業(yè)的發(fā)展, 以及農(nóng)藥( 殺蟲(chóng)劑、除草劑等) 的大量使用, 有機(jī)化合物對(duì)環(huán)境的危害和污染日益嚴(yán)重。

　　目前被列入有機(jī)污染物監(jiān)測(cè)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法中的熒光分析法有；冷原子熒光法對(duì)有機(jī)汞的測(cè)定；乙?；癁V紙層析熒光分光光度法對(duì)大氣飄塵和水體中苯并( a) 芘的測(cè)定；酚類(lèi) 、木質(zhì)磺酸酯、多環(huán)芳烴( 芘、螢、蒽) [ PASH]的熒光分析法測(cè)定等。