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已證明敲除效率的siRNA：
    在預(yù)設(shè)計siRNA產(chǎn)品中，用熒光定量PCR方法進行驗證實際沉默率
    每個靶基因可提供2條已驗證的siRNA
    提供實時定量PCR引物，可以用SYBR Green熒光染料進行實時定量PCR檢測敲除效率

當(dāng)病毒基因、人工轉(zhuǎn)入基因、轉(zhuǎn)座子等外源性基因隨機整合到宿主細胞基因組內(nèi)，并利用宿主細胞進行轉(zhuǎn)錄時，宿主細胞常產(chǎn)生一些dsRNA。宿主細胞胞質(zhì)中的核酸內(nèi)切酶Dicer將dsRNA切割成多個具有特定長度和結(jié)構(gòu)的小片段RNA（大約21～23 bp），即siRNA。siRNA在細胞內(nèi)RNA解旋酶的作用下解鏈成正義鏈和反義鏈，繼之由反義siRNA再與體內(nèi)一些酶（包括內(nèi)切酶、外切酶、解旋酶等）結(jié)合形成RNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合物（RNA-induced silencing complex，RISC）。RISC與外源性基因表達的mRNA的同源區(qū)進行特異性結(jié)合，RISC具有核酸酶的功能，在結(jié)合部位切割mRNA，切割位點即是與siRNA中反義鏈互補結(jié)合的兩端。被切割后的斷裂mRNA隨即降解，從而誘發(fā)宿主細胞針對這些mRNA的降解反應(yīng)。在正常生物體內(nèi)，RNA干擾起到抗病毒、抑制基因過量表達的作用。