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miRNA/ lncRNA northern技術服務簡單介紹:
是真核生物中一類長度約為20-25 nt(核苷酸)的非編碼單鏈RNA分子,在生物進化過程中高度保守,約占整個基因組基因總數(shù)2%。大量研究表明,miRNA在多種生物過程中起關鍵作用,包括細胞的發(fā)育、分化、增殖和凋亡等;并且功能研究已證實多種miRNA分子與腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程相關,miRNA具有類似于致癌基因或抑癌基因的作用。
zui早被發(fā)現(xiàn)的兩個miRNAs——lin-4和let-7被認為是通過不*互補結(jié)合到目標靶mRNA3'非編碼區(qū)端,以一種未知方式誘發(fā)蛋白質(zhì)翻譯抑制,進而抑制蛋白質(zhì)合成,阻斷mRNA的翻譯。也有miRNA可以與目標靶基因*互補,從而抑制基因的表達,提示miRNA可能包含和 siRNA類似的作用方式。
miRNA/ lncRNA northern技術服務隨著miRNA研究的不斷深入,各種研究方 法層出不窮,包括miRNA芯片、Real time-PCR、Northern Blot、RNA酶保護實驗等等。而在這些方法中zui經(jīng)典方法的當屬miRNA Northern Blot,miRNA Northern Blot具有結(jié)果直觀、可靠等方面的優(yōu)勢,因此許多SCI雜志要求miRNA方面的研究需提供Northern Blot實驗結(jié)果。
miRNA/ lncRNA northern技術服務美國Signosis的miRNA Northern Blot檢測試劑以其簡便的實驗操作步驟為廣大研究人員所稱道,特別是基于技術開發(fā)的高敏miRNA Northern Blot檢測試劑,因其能夠檢測到低豐度的miRNA而成為美國Signosis的明星產(chǎn)品。使用美國Signosis開發(fā)的miRNA Northern Blot試劑發(fā)表了很多高水平的SCI文章,下面通過對其中幾篇文獻的分析來向大家詳細介紹美國Signosis miRNA Northern Blot檢測試劑。
1. 文獻一:Effect of miR-23 on Oxidant-Induced Injury in Human Retinal Pigment Epithelial Cells
該文章中,作者使用miRNA Northern Blot檢測試劑檢測正常以及AMD病變的RPE細胞中miR-23a的表達情況。如上圖所示,實驗結(jié)果條帶清晰,明顯可見在不同樣本中miR-23a的表達差異。
2. 文獻二:Functional analysis of microRNAs in human hepatocellular cancer stem cells
使用miRNA Northern Blot檢測試劑分析不同樣本中miR-181a和let-7a的表達情況。從上圖可以看到,兩種miRNA的表達量在正常HepG2細胞中表達量很低,而在N-LSC、HSC-SR、HSC-DF中表達量依次上升。從圖中可以看到,即使是使用普通的miRNA Northern Blot檢測試劑,也可以清楚地檢測到低表達的miRNA。
3. 文獻三:Characterization of the stress associated microRNAs in Glycine max by deep sequencing
該文章使用的是Signosis高敏miRNA Northern Blot檢測試劑,檢測了不同樣品中的多個miRNA表達,結(jié)果中可以清晰地看到低豐度的miRNA條帶,同時高表達miRNA條帶形狀也很美觀,沒有聚集成一團。Signosis高敏miRNA Northern Blot檢測試劑可以清楚分辨miRNA表達差異,特別在檢測靈敏度較普通的高出1到2個數(shù)量級。
從上面三篇文獻的Northern Blot實驗結(jié)果來看,Signosis研發(fā)的普通及高敏miRNA Northern Blot檢測試劑效果是穩(wěn)定的。整套試劑包含實驗所有組分,客戶只需相應的儀器即可完成實驗所有步驟??梢郧逦臋z測到低豐度miRNA,同時也不會影響到對高豐度miRNA的檢測。
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