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目前OLYMPUS已經(jīng)推出了第三代的全內(nèi)反射熒光顯微鏡（Total Internal Reflection Fluorescence Microscopy，TIRFM）照明系統(tǒng)。自從1998 OLYMPUS推出了世界上*臺商業(yè)用TIRFM照明器，開發(fā)的產(chǎn)品更加強化了我們在該領(lǐng)域的地位。高數(shù)值孔徑復(fù)消色差物鏡100x/1.65NA 和60x/1.45NA更加完善了我們的系統(tǒng)。TIRFM是一種非常特殊的光學(xué)技術(shù)，目前已經(jīng)被細胞生物學(xué)家和神經(jīng)科學(xué)家廣泛應(yīng)用，使用該技術(shù)可以觀察到單分子和研究細胞膜。

TIRFM技術(shù)依賴于斜射光線在兩種不同折射率光學(xué)介質(zhì)表面產(chǎn)生的極淺的消逝波。該效應(yīng)產(chǎn)生的條件是入射介質(zhì)折射率大于折射介質(zhì)，并且斜射照射到光學(xué)界面時入射角大于全反射臨界角。殘余的消逝波擴散進入低折射率介質(zhì)，并且隨著擴散深度的增加，光強成指數(shù)遞減。利用消逝波極淺的穿透性，可以在光學(xué)表面100nm以內(nèi)照明和激發(fā)熒光染料，因此幾乎*排除了細胞體內(nèi)的自發(fā)熒光干擾，與傳統(tǒng)熒光照明技術(shù)相比，極大的改善了圖像的信噪比。
Olympus是*家將TIRFM系統(tǒng)開發(fā)為商業(yè)產(chǎn)品的公司。一代的TIRFM照明器可以通過光纖同時提供3種不同波長的多譜線照明。在安裝照明器時不需要對IX2顯微鏡的鏡體改造。內(nèi)置千分尺可以非常方便的調(diào)節(jié)激光照明。 
我們的物鏡TIRFM系統(tǒng)支持傳統(tǒng)的反射和透射寬視野觀察，如明場、暗場、相襯和微分干涉襯（DIC）觀察。 物鏡TIRFM系統(tǒng)不同于棱鏡TIRFM系統(tǒng)，棱鏡TIRFM系統(tǒng)需要在標(biāo)本上方安裝價格昂貴的棱鏡系統(tǒng)，而且安裝棱鏡還會使透射光觀察技術(shù)受限制，并會造成標(biāo)本振動。物鏡TIRFM系統(tǒng)技術(shù)的核心是OLYMPUS引以為豪的*的復(fù)消色差TIRFM物鏡，包括兩種100x and 一種60x 物鏡，其數(shù)值孔徑更是分別達到了1.65 和 1.45。 使用100X TIRFM物鏡，其明場熒光顯微鏡的亮度比傳統(tǒng)100Xoil/1.4N.A. 物鏡提高了28%，分辨率也由0.240μm提高到0.203μm。這種高數(shù)值孔徑的TIRFM物鏡同時*化了有效操作面的調(diào)整和激光照明角度的調(diào)節(jié)。此外，TIRMF物鏡也適用于其他反射光技術(shù)。

 

 
為消逝波照明設(shè)計的三種高數(shù)值孔徑
100X N.A.: 1.65
??*的數(shù)值孔徑，提供非常明亮的熒光圖像
??目前世界zui高的分辨率
?可以提供更大角度的傾斜照明，因此可以產(chǎn)生極淺的消逝波
??需要特殊的鏡油和蓋玻片

100X N.A.: 1.45
??更高的性價比和方便的操作性
??可以使用常用的標(biāo)準(zhǔn)鏡油和蓋玻片

60X N.A.: 1.45
??更容易接受的價格和更方便的操作性
??可以兼容高對比度和高分辨率DIC棱鏡
??結(jié)合IX71或IX81內(nèi)置1.6X變倍，可以提供96X 放大
??可以校正溫度引起的球差變化
??可以使用常用的標(biāo)準(zhǔn)鏡油和蓋玻片

激光保護
激光通過單模式（single mode）光纖直接導(dǎo)入顯微鏡。采用聯(lián)動模式放置激光射出顯微鏡或通過目鏡刺激到眼睛。

引入多激光
通過可選的激光整合器可以同時引入3條激光。
可使用激光：
Argon 488nm，HeNe-R 633nm，HeNe-G 543nm

簡單調(diào)節(jié)即可完成激光照明調(diào)節(jié)
對單模式（single mode）光纖激光頭和TIRFM照明器進行初始調(diào)節(jié)后，后期的調(diào)節(jié)只需要簡單的調(diào)節(jié)千分尺，就可以改變TIRFM照明。

可以使用弧光燈觀察熒光
TIRFM照明器可以同時連接標(biāo)準(zhǔn)的弧光燈照明器，允許同時觀察消逝波和標(biāo)準(zhǔn)照明熒光。