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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
詳細(xì)介紹
雖然流式技術(shù)在過去的30年中，實(shí)現(xiàn)了長(zhǎng)足的發(fā)展，并早已成為生命科學(xué)研究*的研究手段。然而，其數(shù)據(jù)結(jié)果始終沒能突破散點(diǎn)圖和直方圖的固定數(shù)據(jù)模式，除了圈門和計(jì)數(shù)用戶無法探究數(shù)據(jù)背后的更深層次內(nèi)涵，更無法將這個(gè)技術(shù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)力量釋放出更大的潛能。
不同于傳統(tǒng)流式細(xì)胞分析技術(shù)，ImageStreamX MarkII量化成像分析流式細(xì)胞儀除了可以獲得基于熒光信號(hào)強(qiáng)度的散點(diǎn)圖和直方圖以外，還可以為高速液流中的每個(gè)細(xì)胞同步生成多達(dá)12張高清成像圖片，包含明場(chǎng)和暗場(chǎng)以及多達(dá)10通道且明顯優(yōu)于傳統(tǒng)流式分析技術(shù)的高靈敏度熒光數(shù)據(jù)結(jié)果。更為重要的是，ImageStreamX MarkII量化成像分析流式細(xì)胞儀不僅僅是簡(jiǎn)單的細(xì)胞成像，并可以根據(jù)多達(dá)100種以上的形態(tài)學(xué)量化參數(shù)對(duì)不同的細(xì)胞進(jìn)行區(qū)分和計(jì)數(shù)。超高的檢測(cè)靈敏度以及快速分析的特點(diǎn)充分滿足稀有細(xì)胞分析的需要。
產(chǎn)品應(yīng)用
ImageStreamX MarkII量化成像分析流式細(xì)胞儀巧妙地將流式細(xì)胞技術(shù)在免疫表型分析方面的統(tǒng)計(jì)學(xué)力量以及該方法本身在細(xì)胞分析領(lǐng)域的高靈敏度和高速度優(yōu)勢(shì)同熒光顯微鏡技術(shù)在細(xì)胞形態(tài)學(xué)細(xì)節(jié)的洞察力和針對(duì)細(xì)胞功能研究的深度有機(jī)地結(jié)合在一起，實(shí)現(xiàn)了上述兩項(xiàng)技術(shù)單獨(dú)均無法突破的應(yīng)用瓶頸，為流式細(xì)胞技術(shù)開啟了一扇全新的應(yīng)用之門。
ImageStreamX MarkII量化成像分析流式細(xì)胞儀研發(fā)伊始就是要?jiǎng)?chuàng)造一款細(xì)胞研究的綜合平臺(tái)，采用和傳統(tǒng)流式細(xì)胞儀及熒光顯微鏡相同的染料和生物標(biāo)記物，可以實(shí)現(xiàn)傳統(tǒng)流式細(xì)胞技術(shù)的全部應(yīng)用，同事它還將帶給您不一樣的視覺驗(yàn)證以及*的量化成像分析。
ImageStreamX MarkII量化成像分析流式細(xì)胞儀可用于細(xì)胞形態(tài)變化、細(xì)胞自噬作用、細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、共定位和示蹤等研究場(chǎng)景。
細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)（*的應(yīng)用）
細(xì)胞活性、分化及宿主防御功能受到多種過程調(diào)節(jié)，其中轉(zhuǎn)錄因子從細(xì)胞質(zhì)到細(xì)胞核的轉(zhuǎn)運(yùn)過程則是一個(gè)重要的環(huán)節(jié)。利用Dimilarity形態(tài)學(xué)量化參數(shù)，通過對(duì)相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子和細(xì)胞核的圖像進(jìn)行自動(dòng)分析處理，精確量化細(xì)胞內(nèi)分子的核運(yùn)轉(zhuǎn)程度。
實(shí)驗(yàn)案例：NF-κB在全血不同白細(xì)胞中的轉(zhuǎn)運(yùn)
選取經(jīng)免疫分型檢測(cè)的全血，通過60倍成像定量分析NF-kB在不同白細(xì)胞類型中的轉(zhuǎn)運(yùn)程度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，脂多糖能夠特異性的誘導(dǎo)NF-kB在單核細(xì)胞中的核轉(zhuǎn)運(yùn)（直方圖藍(lán)色部分，右下圖），但并不誘導(dǎo)T細(xì)胞中的轉(zhuǎn)運(yùn)過程（直方圖黑色部分，右上圖）。
共定位和示蹤（*的應(yīng)用）
Amnis量化成像分析流式細(xì)胞儀具備快速采集大量細(xì)胞圖像數(shù)據(jù)的能力，并結(jié)合系統(tǒng)中Bright Detail Similarity形態(tài)學(xué)量化參數(shù)對(duì)細(xì)胞圖像進(jìn)行客觀的定量統(tǒng)計(jì)分析，極大的優(yōu)化了共定位的研究。
實(shí)驗(yàn)案例：CpGB在原代漿樣樹突狀細(xì)胞中的內(nèi)化和轉(zhuǎn)運(yùn)
通過利用Internalization（Y軸）以及Bright Detail Similarity（X）軸兩個(gè)參數(shù)對(duì)圖像進(jìn)行分析，可以量化pDC內(nèi)的CpGB向溶酶體的的定向轉(zhuǎn)運(yùn)過程。右圖顯示pDC（橙色）、CpGB（紅色）和溶酶體（綠色）的熒光圖像。散點(diǎn)圖的左下方所示，為結(jié)合在pDC細(xì)胞表面的CpGB。隨著CpGB進(jìn)入pDC， Internalization值升高（圖左上方）。當(dāng)CpGB轉(zhuǎn)移到溶酶體，其與溶酶體之間的similaity值相應(yīng)升高（圖右上方）。
細(xì)胞形態(tài)研究（*的應(yīng)用）
細(xì)胞形態(tài)的變化往往與細(xì)胞功能有密切的關(guān)系，尤其在巨噬細(xì)胞活化，干細(xì)胞分化以及細(xì)胞藥物反應(yīng)等方面表現(xiàn)更為突出。Amnis量化成像分析流式細(xì)胞儀可以應(yīng)用其所標(biāo)配的IDEAS專業(yè)分析軟件中的預(yù)置的形態(tài)學(xué)量化參數(shù)對(duì)細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行客觀的自動(dòng)化評(píng)價(jià)，Cicularity數(shù)值就是眾多形態(tài)學(xué)量化參數(shù)的其中之一。
Circularity數(shù)值是衡量細(xì)胞的多個(gè)半徑間差異的指標(biāo)?？v坐標(biāo)表示circularity數(shù)值，當(dāng)所測(cè)算的細(xì)胞樣本如左圖所示，處于圓形且較完整，其多個(gè)半徑間差異相對(duì)較低，因而Circularity數(shù)值較高，而當(dāng)樣本如右圖所示形狀并不規(guī)則時(shí)，其多個(gè)半徑間的差異較大，因而Circularity數(shù)值較低。
實(shí)驗(yàn)案例：原代單核細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化
縱坐標(biāo)表示Circularity。與對(duì)照相比，用MCP-1處理的樣品，Circularity數(shù)值明顯降低，證明趨化因子MCP-1誘導(dǎo)單核細(xì)胞形態(tài)發(fā)生變化，并遷移到炎癥部位。反之，如果通過藥物處理，如自身免疫性疾病的藥物，可降低炎癥反應(yīng)，則Circularity數(shù)值升高。
細(xì)胞自噬（*的應(yīng)用）
細(xì)胞發(fā)生自噬時(shí)，作為標(biāo)記物的細(xì)胞質(zhì)LC3蛋白經(jīng)過加工在自噬體外膜表面大量聚集。利用Spot Count形態(tài)學(xué)量化參數(shù)，能夠直觀觀察LC3熒光斑點(diǎn)的同時(shí)，準(zhǔn)確統(tǒng)計(jì)每個(gè)細(xì)胞內(nèi)LC3斑點(diǎn)的數(shù)量，從而對(duì)細(xì)胞自噬狀態(tài)進(jìn)行量化分析。
ImageStreamX MarkII量化成像分析流式細(xì)胞儀中包含的IDEAS圖像處理軟件能夠準(zhǔn)確每個(gè)細(xì)胞中的熒光斑點(diǎn)數(shù)。如圖所示，利用Spot Count形態(tài)學(xué)量化參數(shù)計(jì)算出不同細(xì)胞內(nèi)含有的LC3-FITC數(shù)量不同。實(shí)驗(yàn)過程見右圖。
實(shí)驗(yàn)案例：慢性粒白血病細(xì)胞K562的自噬
K562細(xì)胞癌抗腫瘤藥物toposide作用下發(fā)生自噬。上圖右側(cè)所示為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組中細(xì)胞的明場(chǎng)，（BF），LC3-FITC（綠色）和DAP（紫色）染色結(jié)果。每個(gè)樣本收集超過10000個(gè)細(xì)胞，并利用IDEAS軟件系統(tǒng)中Spot Count形態(tài)學(xué)量化參數(shù)精確定量每個(gè)細(xì)胞中的LC3斑點(diǎn)數(shù)。統(tǒng)計(jì)結(jié)果如左側(cè)直方圖所示，實(shí)驗(yàn)組中含有FIC-LC3熒光斑點(diǎn)的細(xì)胞（44%）遠(yuǎn)高于對(duì)照組（13%）。
T細(xì)胞和APC細(xì)胞間免疫突觸的形成（*的應(yīng)用）
T細(xì)胞與APC細(xì)胞表面粘附分子之間通過受體—配體相互作用得以緊密接觸，形成了一個(gè)環(huán)形且周圍分布著粘附分子的瞬時(shí)性結(jié)構(gòu)，稱為免疫突觸。Amnis的可視化圈門的功能結(jié)合IDEAS軟件的特殊量化參數(shù)，可以特異地找到形成了免疫突觸的黏連體細(xì)胞，量化分析T細(xì)胞與APC細(xì)胞間形成的免疫突觸。
實(shí)驗(yàn)案例：原代單核細(xì)胞的形態(tài)變化
