徠卡生物顯微鏡的光學(xué)技術(shù)參數(shù)

焦深為焦點深度的簡稱，即在使用徠卡生物顯微鏡時，當(dāng)焦點對準一物體點時，不僅位于該點平面上的各點都可看清楚，而且在此平面上下一定厚度內(nèi)，也能看得清楚，這個清晰部分的厚度就是焦深。焦深大，可看到被檢物體的全層，而焦深小，則只能看到被檢物體的一薄層。

1.焦深與總放大倍率及物鏡的數(shù)值孔徑值成反比，放大倍率愈高，數(shù)值孔徑值愈大，焦深則愈小。

2.焦深對條件的要求恰好與分辨率相反，分辨率高則焦深變小。因此，在使用高倍物鏡并求高度分辨率的觀察時，由于焦深小，必須運用細調(diào)焦裝置上下調(diào)節(jié)，以觀察被檢物體的全層，彌補焦深小的缺陷。但是，在進行顯微照相時，則不能如此，而就當(dāng)盡量利用焦深大的物鏡。如40×物鏡，數(shù)值孔徑有0.65、0.70.0.85.0.95四種類型，觀察時，選用NA為0.95的物鏡，可得到好的觀察效果；而顯微照相時，可根據(jù)制片情況適當(dāng)選用NA值小的物鏡，才能得到比前者焦深大的效果。

3.被檢物體周圍介質(zhì)的折射率加大，可增大焦深。尤其在顯微照相時，更應(yīng)考慮封片劑的使用。

徠卡生物顯微鏡的焦深即使是大的，實際上數(shù)值卻是很小的，只能看清楚幾個或十幾個微米薄層內(nèi)的物相。

在使用高倍鏡進行顯微照相時，焦深小時矛盾更為突出。因此，在使用100×的高倍物鏡時，可選用帶虹彩光闌的物鏡，以改變鏡口角的大小，從而改變NA值，以調(diào)節(jié)焦深的大小。

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