*次使用YQX-Ⅱ厭氧箱的用戶需要仔細(xì)閱讀操作手冊,在這里我們做個使用步驟歸納:
*步、先將培養(yǎng)操作室形成厭氧環(huán)境:
1、按使用要求在培養(yǎng)操作室內(nèi)放置除氧催化器及已封閉的培養(yǎng)皿等。500g鈀粒除氧劑(密封狀態(tài))和500克干燥劑。
2、按下電源開關(guān),關(guān)緊取樣室內(nèi)、外門,按下真空泵按鈕將取樣室抽成負(fù)壓(見真空表指針指向0.06MPa)。
3、要將培養(yǎng)操作室內(nèi)的氧氣含量達到極微量狀態(tài),須經(jīng)三次氣體置換:(1)*次氣體置換,純度為99.99%的氮氣。把乳膠手套套在法蘭圈上并扎緊。按下箱內(nèi)氮氣進開關(guān),氮氣即達到充足狀態(tài),再按動此開關(guān),即關(guān)閉。雙手伸入乳膠手套,并隨即踏腳踏開關(guān),氮氣即會漸漸充入培養(yǎng)室。(2)第二次氣體置換(氮氣置換),重復(fù)一次充氮過程,取樣室先抽真空,并注意隨時用腳踏開關(guān)開閉排氣。(3)第三次置換混合氣體,混合氣體配比為:N2↑90%、H2↑5%、CO2↑5%,純度均為99.99%。先將取樣室抽真空,至真空表指針指向0.06MPa。按下箱內(nèi)混合氣進開關(guān),混合氣體達到充足狀態(tài),再按動此開關(guān),即關(guān)閉。按下箱內(nèi)混合氣微調(diào)開關(guān),使混合氣體按一定的流量充入培養(yǎng)室。通過三次換氣后,培養(yǎng)操作室內(nèi)氣體含氧量已處于極微量狀態(tài)。
4、培養(yǎng)操作室內(nèi)打開鈀粒除氧劑,接通除氧催化器電源進行催化除氧。
5、用戶使用前或使用后如需操作培養(yǎng)室、取樣室滅菌,可打開內(nèi)置培養(yǎng)箱外門即取樣室內(nèi)門,后開啟控制面板殺菌開關(guān),可將操作室等進行滅菌處理。時間長短可根據(jù)用戶實際需要自定。
第二步、將菌種置入和培養(yǎng)
1、檢查取樣室內(nèi)門并將它關(guān)緊。
2、打開取樣室外門,將菌種放入取樣室后即關(guān)上外門。
3、完成取樣室充氮置換三次過程:打開真空泵,先抽真空至0.06MPa以上停,然后人工打開過道氮氣進開關(guān),當(dāng)指針回復(fù)零位后關(guān)掉過道氮氣進開關(guān)。重復(fù)以上操作進行第二次氮氣置換。第三次氣體置換操作時,抽真空度0.06MPa以上停,然后打開過道混合氣進開關(guān)充進混合氣體,當(dāng)指針回復(fù)零位后關(guān)掉過道混合氣進開關(guān)。取樣室充氣置換三次過程結(jié)束。
4、為保證培養(yǎng)操作室厭氧環(huán)境不被破壞,選取較低真空度進行充氮置換時應(yīng)增加置換次數(shù)。
5、開啟取樣室內(nèi)門,將菌種從取樣室移入培養(yǎng)操作室,再將取樣室內(nèi)門關(guān)緊,再抽真空檢查內(nèi)門是否關(guān)緊。
6、如培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用,則必須:(1)每天在培養(yǎng)操作室內(nèi)觀察,如發(fā)現(xiàn)不正常就必須更換氣體。(2)如用戶在操作時,由于產(chǎn)品結(jié)構(gòu)的原因,在停止供氣12小時以后,有可能存在極微量的滲漏,或培養(yǎng)所需菌種需求要求微量混合氣體的補充時,可經(jīng)內(nèi)置過濾器連續(xù)輸入微量的混合氣體,使補進的氮氣能和微量的氧氣結(jié)合并被催化吸收,保證箱內(nèi)厭氧狀態(tài),補入混合氣流量為每分鐘10ml左右。(3)連續(xù)培養(yǎng)一天,更換一次除氧劑和干燥劑。
7、培養(yǎng)操作室內(nèi)溫度可在溫控范圍內(nèi)任意選擇和控制。
8、混合氣瓶,氮氣瓶輸出壓力調(diào)整:調(diào)節(jié)減壓閥,使輸出壓力為0.02Mpa左右。
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