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顯微鏡專業(yè)術語解析
1、數(shù)值孔徑：
數(shù)值孔徑是物鏡和聚光鏡的主要技術參數(shù)，數(shù)值孔徑簡寫NA，是判斷兩者（尤其對物鏡而言）性能高低的重要標志。其數(shù)值的大小，分別標刻在物鏡和聚光鏡的外殼上。
數(shù)值孔徑（NA）是物鏡前透鏡與被檢物體之間介質(zhì)的折射率（n）和孔徑角（u）半數(shù)的正弦之乘積。用公式表示如下：NA=nsinu/2
孔徑角又稱鏡口角，是物鏡光軸上的物體點與物鏡前透鏡的有效直徑所形成的角度?？讖浇窃酱?，進入物鏡的光通亮就越大，它與物鏡的有效直徑成正比，與焦點的距離成反比。
顯微鏡觀察時，若想增大NA值，孔徑角是無法增大的，*的辦法是增大介質(zhì)的折射率n值?；谶@一原理，就產(chǎn)生了水浸物鏡和油浸物鏡，因介質(zhì)的折射率n值大于1，NA值就能大于1。數(shù)值孔徑zui大值為1.4，這個數(shù)值在理論上和技術上都達到了極限。目前，有用折射率高的溴萘作介質(zhì)，溴萘的折射率為1.66,所以NA值可大于1.4。
這里必須指出，為了充分發(fā)揮物鏡數(shù)值孔徑的作用，在觀察時，聚光鏡的NA值應等于或略大于物鏡的NA值。
數(shù)值孔徑與其他技術參數(shù)有著密切的關系，它幾乎決定和影響著其他各項技術參數(shù)。它與分辨率成正比，與放大率成正比，與焦深成反比，NA值增大，視場寬度與工作距離都會相應地變小。
2、分辨率
顯微鏡的分辨率是指能被顯微鏡清晰區(qū)分的兩個物點的zui小間距，又稱鑒別率。其計算公式是σ=λ/NA，式中σ為zui小分辨距離；λ為光線的波長；NA為物鏡的數(shù)值孔徑?？梢娢镧R的分辨率是由物鏡的NA值與照明光源的波長兩個因素決定。NA值越大，照明光線波長越短，則σ值越小，分辨率就越高。
要提高分辨率，即減小σ值，可采取以下措施：
（1）降低波長λ值，使用短波長光源。
（2）增大介質(zhì)n值以提高NA值（NA=nsinu/2）。
（3）增大孔徑角u值以提高NA值。
（4）增加明暗反差。
3、放大率和有效放大率
由于經(jīng)過物鏡和目鏡的兩次放大，所以顯微鏡總的放大率Γ應該是物鏡放大率β和目鏡放大率Γ1的乘積：Γ=βΓ1
顯然，和放大鏡相比，顯微鏡可以具有高得多的放大率，并且通過調(diào)換不同放大率的物鏡和目鏡，能夠方便地改變顯微鏡的放大率。
放大率也是顯微鏡的重要參數(shù)，但也不能盲目相信放大率越高越好。顯微鏡放大倍率的極限即有效放大倍率。
分辨率和放大倍率是兩個不同的但又互有的概念。
有關系式： 500NA<Γ<1000NA
當選用的物鏡數(shù)值孔徑不夠大，即分辨率不夠高時，顯微鏡不能分清物體的微細結構，此時即使過度地增大放大倍率，得到的也只能是一個輪廓雖大但細節(jié)不清的 圖像，稱為無效放大倍率。反之如果分辨率已滿足要求而放大倍率不足，則顯微鏡雖已具備分辨的能力，但因圖像太小而仍然不能被人眼清晰視見。所以為了充分發(fā)揮顯微鏡的分辨能力，應使數(shù)值孔徑與顯微鏡總放大倍率合理匹配。
4、焦深
焦深為焦點深度的簡稱，即在使用顯微鏡時，當焦點 對準某一物體時，不僅位于該點平面上的各點都可以看清楚，而且在此平面的上下一定厚度內(nèi)，也能看得清楚，這個清楚部分的厚度就是焦深。焦深大, 可以看到 被檢物體的全層，而焦深小，則只能看到被檢物體的一薄層，焦深與其他技術參數(shù)有以下關系：
（1）焦深與總放大倍數(shù)及物鏡的數(shù)值孔徑成反比。
（2）焦深大，分辨率降低。
由于低倍物鏡的景深較大，所以在低倍物鏡照相時造成困難。在顯微照相時將詳細介紹。
5、視場直徑
觀察顯微鏡時，所看到的明亮的圓形范圍叫視場，它的大小是由目鏡里的視場光闌決定的。視場直徑也稱視場寬度，是指在顯微鏡下看到的圓形視場內(nèi)所能容納被檢物體的實際范圍。視場直徑愈大，愈便于觀察。
有公式 F=FN/β，式中F: 視場直徑，F(xiàn)N：視場數(shù)（Field Number, 簡寫為FN，標刻在目鏡的鏡筒外側），β:物鏡放大率。由公式可看出：
（1）視場直徑與視場數(shù)成正比。
（2）增大物鏡的倍數(shù)，則視場直徑減小。因此，若在低倍鏡下可以看到被檢物體的全貌，而換成高倍物鏡，就只能看到被檢物體的很小一部份。
6、覆蓋差
顯微鏡的光學系統(tǒng)也包括蓋玻片在內(nèi)。由于蓋玻片的厚度不標準，光線從蓋玻片進入空氣產(chǎn)生折射后的光路發(fā)生了改變，從而產(chǎn)生了相差，這就是覆蓋差。覆蓋差的產(chǎn)生影響了顯微鏡的成響質(zhì)量。
上規(guī)定，蓋玻片的標準厚度為0.17mm，許可范圍在0.16-0.18mm，在物鏡的制造上已將此厚度范圍的相差計算在內(nèi)。物鏡外殼上標的0.17，即表明該物鏡所要求的蓋玻片的厚度。
7、工作距離
工作距離也叫物距，簡稱WD，即指物鏡前透鏡的表面到被檢物體之間的距離。鏡檢時，被檢物體應處在物鏡的一倍至二倍焦距之間。因此，它與焦距是兩個概念，平時習慣所說的調(diào)焦，實際上是調(diào)節(jié)工作距離。
在物鏡數(shù)值孔徑一定的情況下，工作距離短孔徑角則大。
數(shù)值孔徑大的高倍物鏡，其工作距離小。
8、物鏡
物鏡是顯微鏡zui重要的光學部件，利用光線使被檢物體*次成象，因而直接關系和影響成象的質(zhì)量和各項光學技術參數(shù)，是衡量一臺顯微鏡質(zhì)量的首要標準。
物鏡的結構復雜，制作精密，由于對象差的校正，金屬的物鏡筒內(nèi)由相隔一定距離并被固定的透鏡組組合而成。物鏡有許多具體的要求，如合軸,齊焦。
齊焦既是在鏡檢時，當用某一倍率的物鏡觀察圖象清晰后，在轉換另一倍率的物鏡時，其成象亦應基本清晰，而且象的中心偏離也應該在一定的范圍內(nèi)，也就是合 軸程度。齊焦性能的優(yōu)劣和合軸程度的高低是顯微鏡質(zhì)量的一個重要標志，它是與物鏡的本身質(zhì)量和物鏡轉換器的精度有關。