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技術(shù)文章

自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀選購(gòu)指南(一)[選購(gòu)寶典]

點(diǎn)擊次數(shù):5163 發(fā)布時(shí)間:2016-3-16

    除非你像猴哥那般火眼金睛,否則,利用血球計(jì)數(shù)板來(lái)數(shù)細(xì)胞是一件痛苦的事情。浪費(fèi)時(shí)間不說(shuō),關(guān)鍵是不準(zhǔn)確,重復(fù)性也不好。若是有多個(gè)樣本,那真是讓人發(fā)瘋。這時(shí),自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀應(yīng)運(yùn)而生,帶來(lái)了更更準(zhǔn)確的細(xì)胞計(jì)數(shù)。
    市場(chǎng)上有多個(gè)品牌的細(xì)胞計(jì)數(shù)儀,乍一看,好像都是經(jīng)典三步曲:上樣-插入-分析。如何選擇一臺(tái)的細(xì)胞計(jì)數(shù)儀,小編來(lái)給你支兩招,讓你只選對(duì)的,不選貴的。首先,想一想平時(shí)主要對(duì)哪些細(xì)胞計(jì)數(shù),它們的大小在什么范圍;其次,你需要什么樣的細(xì)胞信息以及通量水平;你們實(shí)驗(yàn)室打算將多大一塊地方奉獻(xiàn)給細(xì)胞計(jì)數(shù)儀;zui后,你打算花多少錢。
    市場(chǎng)上大部分細(xì)胞計(jì)數(shù)儀都是基于染料,以臺(tái)盼藍(lán)為主,也有碘化丙啶(PI)。正常的健康細(xì)胞能夠排斥臺(tái)盼藍(lán),而當(dāng)細(xì)胞損傷或死亡時(shí),臺(tái)盼藍(lán)可穿透變性的細(xì)胞膜,與DNA 結(jié)合,使其著色,從而區(qū)分出活細(xì)胞和死細(xì)胞。有些細(xì)胞計(jì)數(shù)儀是基于電阻抗法,更簡(jiǎn)便,不需要使用臺(tái)盼藍(lán)染料,但也無(wú)法分辨活細(xì)胞與死細(xì)胞。

    首先為你介紹兩款熱門(mén)的細(xì)胞計(jì)數(shù)儀。之后,哈爾濱德遠(yuǎn)科技開(kāi)發(fā)有限公司還將介紹一些便攜式的細(xì)胞計(jì)數(shù)儀和高通量的儀器,囊括了市場(chǎng)上近期推出的大部分細(xì)胞計(jì)數(shù)儀。我們將提供詳細(xì)的參數(shù)對(duì)比和特性介紹,以便您在選購(gòu)儀器時(shí)能夠方便地參考。
TC20自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀(Bio-Rad)
這款細(xì)胞計(jì)數(shù)儀是由Bio-Rad公司推出的。它的計(jì)數(shù)流程很簡(jiǎn)單,就是“上樣-插入-結(jié)果”。首先將樣品上樣到計(jì)數(shù)玻片上,然后將玻片插入TC20細(xì)胞計(jì)數(shù)儀,計(jì)數(shù)自動(dòng)開(kāi)始,30秒內(nèi)總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞數(shù)就顯示在屏幕上。儀器對(duì)細(xì)胞濃度的要求為5 x 104 -1 x 107 細(xì)胞/ml。計(jì)數(shù)只需要10 µl懸浮或重懸的細(xì)胞,讓珍貴樣品得以保留。玻片上有兩個(gè)室,每次能對(duì)2個(gè)樣品進(jìn)行計(jì)數(shù)。
有些細(xì)胞計(jì)數(shù)儀通過(guò)單個(gè)焦點(diǎn)平面來(lái)評(píng)估細(xì)胞活力,這樣得到的結(jié)論可能不太準(zhǔn)確,而TC20細(xì)胞計(jì)數(shù)儀對(duì)多個(gè)平面的每個(gè)樣品進(jìn)行打分。*的自動(dòng)對(duì)焦技術(shù)和圖像分析算法在30秒內(nèi)提供了準(zhǔn)確且重復(fù)性高的細(xì)胞數(shù)量。Bio-Rad的產(chǎn)品認(rèn)為這對(duì)于評(píng)估細(xì)胞活性尤為重要,因?yàn)榻裹c(diǎn)的差異可能顯著影響結(jié)果。
TC20系統(tǒng)所能接受的細(xì)胞大小是6-50 µm,適合哺乳動(dòng)物細(xì)胞及一些更小的生物,如浮游生物和孢子等。若你正在使用Bio-Rad的Bio-Plex系統(tǒng),那么還可以利用TC10對(duì)Bio-Plex的磁珠進(jìn)行計(jì)數(shù)。
TC20能夠提供下列結(jié)果:活細(xì)胞和死細(xì)胞濃度,總細(xì)胞濃度,細(xì)胞存活率,細(xì)胞的平均大小,細(xì)胞圖像。通過(guò)USB接口,研究人員能導(dǎo)出帶注釋的JPEG圖像文件,用于進(jìn)一步的分析,或下載計(jì)數(shù)的數(shù)據(jù)。當(dāng)然,結(jié)果也能夠打印出來(lái)。 
當(dāng)然,光是一臺(tái)儀器還不夠,你還需要耗材和相關(guān)配件。TC20的耗材有TC20計(jì)數(shù)玻片、TC20臺(tái)盼藍(lán)、TC20系統(tǒng)驗(yàn)證試劑盒,另外,你還可以選擇TC20熱敏打印機(jī)。據(jù)Bio-Rad介紹,TC20計(jì)數(shù)玻片也是很*的,無(wú)論用戶的移液習(xí)慣如何,它都能讓樣品均勻分布,帶來(lái)準(zhǔn)確重復(fù)的結(jié)果。這一點(diǎn)很重要,試想一下,如果有的地方?jīng)]有樣品,那么就會(huì)影響計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性。
Countess 自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀(Life Technologies)
2008年,Life Technologies(當(dāng)時(shí)還是Invitrogen)推出了這款細(xì)胞計(jì)數(shù)儀。它的基本參數(shù)與TC20大致相同,也是利用臺(tái)盼藍(lán)染色和圖像分析算法,在30秒內(nèi)給出準(zhǔn)確的細(xì)胞和活性計(jì)數(shù)。每次的樣本量也是2個(gè),每次需要10 ul,只是可分辨的細(xì)胞大小略有不同,在5-60 um。細(xì)胞濃度范圍應(yīng)在1×104-1×107 細(xì)胞/ml,在1×105-4×106 細(xì)胞/ml。
據(jù)Life Technologies介紹,Countess細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的一個(gè)*之處在于其gating功能,能夠根據(jù)細(xì)胞大小分辨混合群體中的細(xì)胞。在對(duì)某一混合群體計(jì)數(shù)后,用戶隨后可保存特定的參數(shù)組,以便未來(lái)計(jì)數(shù)。此特征對(duì)于干細(xì)胞或原代細(xì)胞特別有用,讓用戶能夠排除細(xì)胞碎片和滋養(yǎng)層細(xì)胞。
有時(shí),細(xì)胞會(huì)成團(tuán),使得細(xì)胞數(shù)量被低估,或細(xì)胞大小被高估,Countess細(xì)胞計(jì)數(shù)儀能夠準(zhǔn)確分辨zui多5-6個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞團(tuán)。
至于儀器的清潔和維護(hù),也非常簡(jiǎn)單。Countess計(jì)數(shù)儀已經(jīng)預(yù)先校準(zhǔn)過(guò)了。如果你升級(jí)了儀器的固件,就需要校準(zhǔn)。另外,如果你換用另一個(gè)牌子的臺(tái)盼藍(lán)或臺(tái)盼藍(lán)濃度與以前不同,那也應(yīng)該重新校準(zhǔn)。校準(zhǔn)只需要2-3分鐘即可。除此之外,就沒(méi)有必要校準(zhǔn)了。
點(diǎn)評(píng):這兩款自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀在參數(shù)上不相伯仲,只有細(xì)胞大小方面的微小差異。TC20的特別之處在于多平面對(duì)焦分析,而Countess則有g(shù)ating功能。現(xiàn)在*未知的就是價(jià)格了,用戶可根據(jù)報(bào)價(jià)再做打算。


 

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