現(xiàn)在給我十個(gè)八個(gè)的從包被到顯色，一個(gè)工作日基本搞定?？墒窃谛吕鲜植倏v過(guò)程中老是會(huì)泛起或大或小的題目，本人在剛開始做人ELISA試劑盒時(shí)就面對(duì)良多災(zāi)題，固然有師兄師姐鋪路，但仍是經(jīng)常做得烏煙瘴氣，好比說(shuō)花板，假陽(yáng)性，全顯色，全部顯色，顯色比空缺還低。
    常用封鎖劑有：0.05%-0.5%的BSA；10%的小牛血清或1%明膠；脫脂奶粉，比較價(jià)廉，可以高濃度使用（5%－10％）；還有一些稀有用到血清（主要為了排除相似蛋白干擾）和酪蛋白等等。詳細(xì)的試驗(yàn)還要有堅(jiān)固的理論外也要實(shí)踐，看一下*可不可以應(yīng)用到自己試驗(yàn)當(dāng)中去。人ELISA試劑盒但*選用什么，要依據(jù)試驗(yàn)詳細(xì)來(lái)實(shí)踐。

     應(yīng)留意以下原理：因?yàn)榈鞍踪|(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過(guò)物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用，這種物理吸附長(zhǎng)短特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面。小分子必需依賴和大的蛋白載體偶聯(lián)后才能固定在固相載體上。人ELISA試劑盒的操縱因固相載體的形成不同而有所差異，海內(nèi)醫(yī)學(xué)檢修一般均用板式點(diǎn)。除特殊情況外，在醫(yī)學(xué)檢修中均以血清作為檢測(cè)標(biāo)本。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物用液時(shí)可用定量多道加液器，使加液過(guò)程迅速完成。如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴，以發(fā)生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。