ELISA試劑盒以含鐵的磁性微粒作為ELISA固相載體，反應(yīng)后用磁鐵的吸引進行分離，洗滌利便，一般均配以特殊儀器。為比較不同固相在某一ELISA測定中的優(yōu)劣，可應(yīng)用如下的試驗：用其他免疫學(xué)測定方法選出一個典型的陽性標本和陰性標本，將它們進行一系列稀釋后，在不同的固相載體上按預(yù)定的ELISA操縱步驟進行測定，然后比較結(jié)果。
ELISA試劑盒載體的外形主要有三種：微量滴定板、小珠和小試管。良好的ELISA板應(yīng)該是吸附機能好，空缺值低，孔底透明度高，ELISA試劑盒各板之間、統(tǒng)一板各孔之間、統(tǒng)一板各孔之間機能相近。再者，球型小珠的表面弧度更有利于吸附的抗原決定簇或抗體結(jié)合位點的暴露面處于*反應(yīng)狀態(tài)，因此珠式ELISA的反應(yīng)往往更為敏捷。IgG對聚苯乙烯等固相具有較強的吸附力，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。
酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟：
1.取出酶標板，設(shè)空白孔，依照次序?qū)?yīng)分別加入100μl的標準品于空白微孔中。
2.分別標記樣品編號，加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中。
3.將酶標板置于37℃溫育30分鐘。
4.將酶標板板取出，將其中的液體甩去，每個孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后，立即甩去液體。
5.每個孔中加滿應(yīng)用洗滌液后，輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去，在吸水紙上將酶標板拍干。
6.重復(fù)第5個步驟5次，在吸水紙上將酶標板拍干。
在ELISA試劑盒中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括:
1.固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板
2.包被抗體(或抗原)的選擇：將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。
3.酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定。
4.酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色。