技術(shù)資料 干粉培養(yǎng)基配制操作方法
1、準(zhǔn)備好干粉培養(yǎng)基、三角瓶、藥勺、無(wú)菌平皿、油性筆等。首先在瓶身上標(biāo)注好培養(yǎng)基的
相關(guān)信息。
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2、將三角瓶置于電子天平上,調(diào)零。按照需要用量,用藥勺把干粉培養(yǎng)基添加到三角瓶中。
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3、稱量之后及時(shí)蓋上培養(yǎng)基瓶蓋,擰緊。用量筒量取適量的蒸餾水或者去離子水。
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4、先加入小部分水以濕潤(rùn)干粉,避免粉塵揚(yáng)起。再加入剩余的水量。充分搖勻。
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5、將培養(yǎng)基加熱煮至沸騰三次,應(yīng)可見溶液澄清透亮,無(wú)明顯瓊脂顆粒掛壁,分層等現(xiàn)象。
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6、塞上透氣硅膠塞,包上牛皮紙或者報(bào)紙,包扎好。放入高壓滅菌鍋中滅菌。(按需設(shè)定滅
菌溫度、時(shí)間)
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7、暫時(shí)不使用的培養(yǎng)基,可以放入50℃烘箱或者水浴中保溫。倒平板時(shí),在超凈工作臺(tái)或
生物安全柜中準(zhǔn)備好無(wú)菌平皿、記號(hào)筆等。
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8、拆開包裝后,將無(wú)菌培養(yǎng)皿倒置,在底部邊緣寫上平板相關(guān)信息。
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9、將標(biāo)記好的無(wú)菌平皿翻轉(zhuǎn)過(guò)來(lái),當(dāng)培養(yǎng)基溫度下降到50℃左右時(shí),傾倒培養(yǎng)基。
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10、倒完后可輕輕圓周搖晃平板三圈,使平板邊緣整齊。將平板鋪開可加速瓊脂冷卻凝固。
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11、使用之前,將平板倒置于無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的烘箱中,55℃、15 分鐘。烘干平板表面水分。
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12、將暫時(shí)不使用的平板用報(bào)紙包成筒狀,用記號(hào)筆標(biāo)清楚平板的種類、配制日期。
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13、然后放進(jìn)2-8℃的冰箱中保存。用時(shí)取出放置室溫下平衡,使用前50℃烘箱烘10 分鐘。
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14.注意事項(xiàng)
(1)培養(yǎng)基在滅菌之前,應(yīng)該充分煮沸至溶液澄清透明無(wú)瓊脂掛壁。
(2)配制量不要超過(guò)容器上*的2/3。盡量使用玻璃器皿配制。不要使用銅、鐵等容器
(3)在烘箱中干燥的平板不要超過(guò)15 分鐘
(4)新鮮自制的平板,可以在2-8℃下保存不得超過(guò)2 個(gè)星期。
(5)在冰箱中保存,平板不要靠近冰箱冷凝管,避免凍壞。取出平衡至室溫后瓊脂有泌水現(xiàn)象,屬于正
常,應(yīng)在烘箱中干燥后再使用。
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