目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-微量法>>微量法生化試劑盒>> BC4265-100T/96S直鏈淀粉含量檢測試劑盒 微量法
CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
---|---|---|---|
分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 100T/96S |
貨號 | BC4265 | 應用領域 | 環(huán)保,化工,生物產業(yè),農業(yè),綜合 |
主要用途 | 直鏈淀粉含量檢測 |
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
試劑一 | 液體110 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體100 mL×1瓶(自備) | 2-8℃保存 |
試劑三 | 液體55 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑四 | - | 2-8℃保存 |
試劑五 | 液體0.5 mL×1支 | 2-8℃保存 |
試劑六 | 液體10mL×1支 | 2-8℃保存 |
標準品 | 粉劑×1支 | 2-8℃保存 |
試劑二:*100 mL自備;
試劑四:提供125 mL空瓶一個;將試劑三:H2O =9 mL:91 mL混勻,現用現配,2-8℃保存半年;
標準品:10 mg直鏈淀粉。臨用前加入0.1 mL無水乙醇和0.9 mL試劑三,混勻后封口膜封口,沸水浴至溶解,即10 mg/mL的直鏈淀粉,2-8℃保存半年。
樣本處理(可適當調整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)
稱取0.01g烘干樣本,加入1mL試劑一,充分勻漿;
80℃水浴提取30min,3000g,25℃離心5min,棄上清,留沉淀;
在步驟2沉淀中加入1mL試劑二(*)振蕩 5min;3000g,25℃離心5min,棄上清,留沉淀;
在步驟3沉淀中加入5mL試劑四充分溶解,90℃水浴10min,冷卻后3000g,25℃離心5min,取上清待測。
分光光度計/酶標儀預熱30min以上,調節(jié)雙波長至550nm和485nm,分光光度計蒸餾水調零。
標準溶液的稀釋:取40μL 10mg/mL標準溶液,加入960μL試劑四,充分混勻,配制成0.4mg/mL標準溶液使用,現用現配。(實驗中每管需要20μL,為減小實驗誤差,故配制大體積。)
操作表 (在1.5mL離心管或96孔板中依次加入下列試劑) :
試劑名稱 | 測定管 | 標準管 | 空白管 |
樣本(µL) | 20 | - | - |
標準溶液(μL) | - | 20 | - |
蒸餾水(µL) | - | - | 20 |
試劑五(µL) | 4 | 4 | 4 |
試劑六(µL) | 4 | 4 | 4 |
蒸餾水(µL) | 172 | 172 | 172 |
充分混勻,測定550nm和485nm處的吸光值,550nm下的測定管、標準管、空白管分別記為A測定、A標準和A空白,485nm下的分別記為A’測定、A’標準和A’空白,計算ΔA測定=(A測定-A空白)-(A’測定-A’空白),ΔA標準=(A標準-A空白)-(A’標準-A’空白)。標準管和空白管只需測1-2次。 |
反應后建議在20min內檢測完成防止褪色。
若A測定大于0.95,建議樣本上清用試劑四稀釋后再進行測定;若A測定低于0.07時,可以提取時減少試劑四體積進行測定。注意同步修改計算公式。
取0.01g烘干玉米于研缽中研碎,加入1mL試劑一,充分勻漿后轉移到 EP 管中,80℃水浴提取30min,3000g,25℃離心5min,棄上清,留沉淀,加入1mL試劑二(*)振蕩5min,3000g,25℃離心5min,棄上清,留沉淀,加入5mL試劑四充分溶解,90℃水浴10min,冷卻后3000g,25℃離心5min,取上清,之后按照測定步驟操作,使用96孔板測得計算ΔA測定=(A測定-A空白)-(A’測定-A’空白)=(0.395-0.047)-(0.283-0.058)=0.123,ΔA標準=(A標準-A空白)-(A’標準-A’空白)=(0.517-0.047)-(0.317-0.058)=0.211,按樣本質量計算含量得:直鏈淀粉含量(mg/g 質量)=2×ΔA測定÷ΔA標準÷W=116.59 mg/g 質量。
直鏈淀粉含量檢測試劑盒 微量法 直鏈淀粉含量檢測試劑盒 微量法