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技術(shù)文章

間接凝集反應(yīng)

閱讀:1018          發(fā)布時(shí)間:2011-1-8

將可溶性抗原(或抗體)先吸附于適當(dāng)大小的顆粒性載體的表面,然后與相應(yīng)抗體(或抗原)作用,在適宜的電解質(zhì)存在的條件下,出現(xiàn)特異性凝集現(xiàn)象,稱間接凝集反應(yīng)(indirectagglutination)或被動(dòng)凝集反應(yīng)(passiveagglutination)。由于這種反應(yīng)適用于各種抗體和可溶性抗原的檢測,其敏感度高于沉淀反應(yīng),因此被廣泛應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)。

    根據(jù)致敏載體用的是抗原或抗體以及凝載體顆粒集反應(yīng)的方式,間接凝集反應(yīng)可分為以下4類
    1.正向間接凝集反應(yīng)  用抗原致敏載體以檢測標(biāo)本中的相應(yīng)抗體。
    2.反向  用特異性抗體致敏載體以檢測標(biāo)本中的相應(yīng)抗原。
正向原理示意圖
反向原理示意圖
 
    3.間接凝集抑制反應(yīng)  診斷試劑為抗原致敏的顆粒載體及相應(yīng)的抗體,用于檢測標(biāo)本中是否存在與致敏抗原相同的抗原。檢測方法是將標(biāo)本先與抗體試劑作用,然后再加入致敏的載體,若出現(xiàn)凝集現(xiàn)象,說明標(biāo)本中不存在相同抗原,抗體試劑未被結(jié)合,因此仍與載體上的抗原起作用。如標(biāo)本中存在相同抗原,則凝集反應(yīng)被抑制。同理可用抗體致敏的載體及相應(yīng)的抗原作為診斷試劑,以檢測標(biāo)本中的抗體,此時(shí)稱反向間接凝集抑制反應(yīng)。
    4.協(xié)同凝集反應(yīng)  協(xié)同凝集反應(yīng)(coagglutination)與的原理相類似,但所用載體是一種金黃色葡萄球菌。它的菌體細(xì)胞壁中含有A蛋白(staphylocoecus protein A,SPA)。SPA具有與IgG的Fc段結(jié)合的特性,因此當(dāng)這種葡萄球菌與IgG抗體連接時(shí),就成為抗體致敏的顆粒載體。如與相應(yīng)抗原反應(yīng),即出現(xiàn)凝集現(xiàn)象。協(xié)同凝集反應(yīng)也適用于細(xì)菌的直接檢測。
間接凝集抑制反應(yīng)原理示意圖
A:標(biāo)本中含抗原  B:標(biāo)本中不含抗原
    在中,可用作載體的顆粒種類很多,常用的有動(dòng)物或人紅細(xì)胞、細(xì)菌和多種惰性顆粒如聚苯乙烯膠乳(polystyrenelatex)、皂土(bentonite)及明膠顆粒、活性炭、火棉膠等。在臨床檢驗(yàn)中zui常用的為間接血凝試驗(yàn)(1HA)和膠乳凝集試驗(yàn)。

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