技術(shù)文章
飼料中的動(dòng)物源性成分鑒別技術(shù)
閱讀:1762 發(fā)布時(shí)間:2010-11-9自1987年英國首先發(fā)生瘋牛病以來,隨后*許多國家都相繼發(fā)現(xiàn)了瘋牛病,大量的證據(jù)表明:飼喂被朊蛋白(prion)污染的反芻動(dòng)物源性蛋白是瘋牛病傳播的主要途徑,為此世界上許多國家和地區(qū)都先后頒布了法律,法規(guī)以控制動(dòng)物源性成分的使用。1994年歐盟和1997年美國都制定了法規(guī)禁止在反芻動(dòng)物的飼料中添加反芻動(dòng)物源性蛋白,1996年世界衛(wèi)生組織建議所有的國家禁止在反芻動(dòng)物的飼料牛添加反芻動(dòng)物源性蛋白,2000年歐盟將這項(xiàng)禁令擴(kuò)大到禁止向用于食用的動(dòng)物飼喂加工過的哺乳動(dòng)物、鳥類和魚類蛋白成分。我國新頒布的《動(dòng)物源性飼料產(chǎn)品安全衛(wèi)生管理辦法》中規(guī)定禁止在反芻動(dòng)物飼料中使用動(dòng)物源性飼料產(chǎn)品(乳及乳制品除外)。飼料中動(dòng)物源性成分特別是牛源性、羊源性成分的檢測(cè)對(duì)于防范瘋牛病的發(fā)生是非常重要的,而這些法規(guī)的有效實(shí)施都需要有一系列的檢測(cè)技術(shù)作為基礎(chǔ)。
目前主要的檢測(cè)方法有;以檢測(cè)骨頭為基礎(chǔ)的顯微鏡方法,以檢測(cè)蛋白質(zhì)為基礎(chǔ)的免疫學(xué)方法和以檢測(cè)DNA為基礎(chǔ)的方法,其他方法還包括近紅外檢方法(NIRS)等。
檢測(cè)動(dòng)物源性成分的*的*方法是被歐盟(EU)認(rèn)可的顯微鏡檢測(cè)方法。這項(xiàng)方法一般是檢測(cè)飼料中的骨頭碎片,能夠區(qū)分陸生動(dòng)物與魚類.骨頭是zui常出現(xiàn)的成分,即使經(jīng)過133~C 3X10‘Pa 20min的處理(歐盟的標(biāo)準(zhǔn))也能被檢測(cè)出來。依靠試驗(yàn)員的經(jīng)驗(yàn),在理想條件下能夠區(qū)分禽類與哺乳動(dòng)物的骨頭碎片并進(jìn)行品質(zhì)的鑒定。在大多數(shù)情況下磷酸二鈣以及脫脂骨、礦物質(zhì)都能檢測(cè)出其來源,但添加到肉骨粉中的蹄角、明膠、血漿很難檢測(cè)出來。目前肉粉、骨粉、肉骨粉、血粉、禽肉粉、魚粉、羽毛粉都能檢測(cè),但并不是在所有的情況下都能鑒別出動(dòng)物的種類。
低倍鏡下沉淀物的一般結(jié)構(gòu)和顏色是鑒別肉骨粉來源的*信號(hào)。哺乳動(dòng)物的骨碎片呈白色或淡黃色,而禽類的顏色發(fā)暗而且比較尖銳,這些骨碎片都不透明,而魚類的骨碎片要比哺乳動(dòng)物和禽類的透明。高倍鏡下可以看到哺乳動(dòng)物的骨碎片呈橢圓或近似圓形,根據(jù)骨碎片的品質(zhì)與透明度的不同,有時(shí)也能看到導(dǎo)管,環(huán)行骨板的方向有時(shí)也能看到。與哺乳動(dòng)物相比,禽類的骨碎片更加尖銳,腺窩更圓,看不到導(dǎo)管。魚類的骨呈扁平狀,其陷窩為拉長(zhǎng)的梭形,連成網(wǎng)狀,而且根據(jù)魚的種類不同也呈現(xiàn)一定的多樣性。這些特征是zui一般的特征,在實(shí)際的檢驗(yàn)中變化較大。肉骨粉中會(huì)出現(xiàn)平滑肌或骨骼肌,不管是哺乳動(dòng)動(dòng)物、禽類還是魚類,肌肉組織一般被破壞成短的纖維,其寬度依據(jù)處理的方法和動(dòng)物的營養(yǎng)狀況而不司。動(dòng)物肌纖維一般沒有各自的明顯特征,肌纖維的出現(xiàn)與否是判定飼料中是否出現(xiàn)動(dòng)物源生成分的重要依據(jù)。飼料中毛發(fā)、羽毛、蛋殼、魚刺、魚鰓的檢出可以進(jìn)一步確定飼料中是否出現(xiàn)動(dòng)物源性成分。歐盟已嘗試通過飼料顯微鏡學(xué)方法來進(jìn)行定量測(cè)定。
飼料顯微鏡學(xué)方法具有樣品制備量少、設(shè)備便宜、簡(jiǎn)單易行的優(yōu)點(diǎn),但是這種方法費(fèi)時(shí)、費(fèi)力、對(duì)技術(shù)人員的要求高,結(jié)果與試驗(yàn)員的經(jīng)驗(yàn)相關(guān)性很大。不同的樣品中所含有的動(dòng)物源性成分的來源多樣,低倍鏡下顏色的重疊比較多,高倍鏡下骨陷窩的重疊性比較大。這要求顯微鏡分析師需要達(dá)到較高的專業(yè)水平。因此,迫切需要建立一套新的、合適的鑒定特征。歐盟已經(jīng)計(jì)劃改善顯微鏡檢測(cè)技術(shù)。zui近歐盟委員會(huì)通過了禁止在種內(nèi)循環(huán)使用同種動(dòng)物源性成分的法令,要求在脊椎動(dòng)物水平上并且在分類學(xué)水平上對(duì)動(dòng)物組織進(jìn)行可靠的鑒定,計(jì)劃的一個(gè)目標(biāo)就是建立新的鑒定標(biāo)準(zhǔn)。除了骨頭碎片,其他碎片(例如骨骼?。┗蛟S會(huì)提供更多的信息。