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磺胺間二甲氧嘧啶殘留檢驗的氣相色譜測定方法
閱讀：1434 發(fā)布時間：2010-10-19（1）試劑和材料 除特殊規(guī)定外，所有試劑均為分析純，水為蒸餾水
①乙腈：用全玻璃器皿重蒸餾，收集81—82~C餾分。
②正己烷：用全玻璃器皿重蒸餾，收集67～69~C餾分。
③三氯甲烷：用全玻璃器皿重蒸餾，收集61—62~C餾分
④乙酸乙酯：用全玻璃器皿重蒸餾，收集76～78~C餾分
⑤丙酮
⑥乙醚：用全玻璃器皿重蒸餾，收集33、34~C餾分。
⑦檸檬酸三鈉溶液：取檸檬酸三鈉，用水制備成飽和溶液。
⑧無水硫酸鈉：650℃灼燒4L。冷卻后貯于密封容器中備用。
⑨重氮甲烷—乙醚溶液：在125ml的蒸餾瓶中，加入35ml乙醇、10ml乙醚和10ml氫氧化鉀水溶液（6s／10mD。放入磁棒，并固定在磁力攪拌器加熱板上的水浴中。連接漏斗和冷凝器并串聯(lián)兩個125m1錐形瓶，錐形瓶中各置有10mi乙醚。冷凝收集管插入乙醚液面下，錐形接收瓶置于冰浴中。滴液漏斗內盛有21．58的N—甲基—N—亞硝基—β—甲苯磺酰胺溶于140ml乙醚的溶液（重氮試劑）。加熱水浴至70~C，進行蒸餾，蒸餾瓶內溶液邊用磁力攪拌，邊滴加重氮試劑，滴*部溶液的時間控制在20rain以上。當餾出液近于無色時，停止蒸餾。將兩個錐形接收瓶中的溶液合并，并在70~C水浴上重蒸餾。將餾出液（重氮甲烷—乙醚溶液）密封，并于一18~C保存。保存期1個月。
注意；重氮甲烷有毒，有特異性過敏，而且易引起爆炸，配制重氮甲烷—乙醚溶液、甲酯化或蒸發(fā)均應在通風櫥中進行。重氮甲烷—乙醚溶液應貯于冷凍器內，不要暴露于直射陽光或強烈的人工光下。
⑩磺胺間二甲氧嘧啶標準品：純度≥99％。
⑩磺胺間二甲氧嘧啶標準溶液（o．100mg／mi）：準確稱取lo．0mg的磺胺間二甲氧嘧啶標準晶，用少量丙酮溶解并準確定容至100ml，搖勻，為標準儲備液。根據(jù)需要再配制成適用濃度的標準工作溶液。
（2）測定步驟
①提取 取經絞碎混勻的試樣約20g（至o．1g）于250ml具塞錐形瓶中，加入50ml乙腈，于振蕩器上提取30rain。用中速定量濾紙將乙腈提取液過濾于蒸發(fā)瓶中，并用30ml乙腈分3次洗滌殘渣。加入10ml鹽酸溶液（1mol／L），然后在35~C水浴中旋轉蒸發(fā)濃縮以除去有機溶劑。
②凈化 將酸相移人至125m1分液漏斗中，再用10mi鹽酸溶液（1m01／L）分兩次洗滌蒸發(fā)瓶，并將洗液并入125m1分液漏斗中。加入20ral正己烷，振搖lmin，靜置10min，棄去有機層。再用2X20ml正己烷重復凈化2次。然后在酸相中加入20ml飽和檸檬酸三鈉溶液，用氫氧化鈉溶液（3mol／L）調節(jié)pH值至5．5～6．o。用3X 20ml三氯甲烷振搖提取3次。合并三氯甲烷提取液，經無水硫酸鈉脫水后，收集于100ml蒸發(fā)瓶中，然后在35~C水浴上旋轉蒸發(fā)至干。
③甲酯化 加入lml丙酮以溶解殘渣，再加入2ml重氮甲烷—乙醚溶液，加塞。室溫下避光放置30rain，其間進行斷續(xù)輕搖。反應結束后，通以氮氣流吹干。準確加入2．00ml乙酸乙酯—正己烷混合液（3+7）以溶解殘渣，供氣相色譜測定。
④標準溶液甲酯化 取適用濃度的標準工作溶液于具塞試管中，用氮氣吹于，按上述操作進行甲酯化后，供氣相色譜測定。
⑤測定
a．色譜條件
色譜柱：30mX0．53mm（內徑）X1．0bm（膜厚） HP50+石英毛細管柱，或相當者
色譜柱溫度：270~C
進樣口溫度：280~C
檢測器溫度：300~C
載氣、尾吹氣：氮氣≥99；99％
進樣方式：柱上進樣
進樣量：2uL
b．色譜測定 分別準確注入2ul的樣品溶液及適用濃度的磺胺間二甲氧嘧啶甲酯標準工作溶液于氣相色譜儀中，按上述條件進行色譜分析。響應值均應在儀器檢測的線性范圍之內。在上述色譜條件下，磺胺間二甲氧嘧啶甲酯的保留時間約為7．5min。
⑥空白試驗 除不加試樣外，均按上述測定步驟進行。
（3）靈敏度和回收率
本方法的測定低限為10ug／kg。
磺胺間二甲氧嘧啶添加濃度在0．01～0．10mg／kg范圍內，回收率為74．0％～107．0％