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1、試劑配制及保存
         緩沖劑               20包         每包加1000mL蒸餾水或純凈水溶解         常溫存放。
         顯色劑                2瓶          每瓶加25mL緩沖液溶解                              4℃冰箱保存，每份加50μL。 
         底    物                5瓶          每瓶加10mL蒸餾水或純凈水溶解              4℃冰箱保存，每份加50μL。
         膽堿酯酶            5瓶          不用配制，直接取用                                     4℃冰箱保存，每份加50μL。 
         酶活力         空白對照3分鐘吸光度變化值（ΔΑ₀）在0.4-0.8之間。

2、樣品提取 
        取2g果蔬樣品（塊莖類取4g）剪成1cm左右見方碎片，放入小燒杯（或取樣瓶）中；加入20mL緩沖液，振蕩1～2min，倒出提取液，靜置2min待測。

3、測試 
        對照測試：于反應(yīng)瓶中加入3mL緩沖液，再分別加入50μL顯色劑和酶液，混勻，37℃下放置30min后加入50μL底物，搖勻并立即倒入比色杯中，放入測試通道，按儀器“對照”鍵測試3min的吸光度變值ΔΑ₀。 
        樣品測試：于反應(yīng)瓶中加入3mL待測樣品液，再分別加入50μL顯色劑和酶液，混勻，37℃下放置30 min后加入50μL底物，搖勻并立即倒入比色杯中，放入測試通道，按儀器“樣品”鍵，測試3min的吸光度變化值ΔΑt。
結(jié)果判定：
        ◇ 以分光光度計(jì)測試時，按以下表達(dá)式計(jì)算出抑制率： 抑制率（%）=[（ΔΑ₀－ΔΑ_t）/ΔΑ₀]×100
        ◇ 以農(nóng)殘檢測儀檢測時其抑制率一般可自動計(jì)算。若樣品抑制率≥70%，表示被測果蔬農(nóng)殘超標(biāo)，為陽性結(jié)果。陽性結(jié)果的樣品需做2次以上重復(fù)檢測，多次檢測仍呈陽性需用氣相色譜等儀器做進(jìn)一步確認(rèn)。 
操作提示：
        在加底物的環(huán)節(jié)中，可預(yù)先將底物加入比色杯，待靜置時間一到，馬上將反應(yīng)瓶中的反應(yīng)液倒入已經(jīng)加有底物的比色杯，并迅速放入測試通道進(jìn)行測試。這樣可以減少同時檢測多個樣品時因加底物時間過長而造成的誤差。

4、注意事項(xiàng)
        酶活性要求：本試劑盒中酶試劑正?；钚?Delta;Α0=0.4～ 0.8，符合NY/T 448-2001方法的要求。
        保存：試劑盒應(yīng)保存4℃冰箱，保質(zhì)期12個月。 
        使用：任何試劑使用時，用一瓶打開一瓶，用完后才使用新的，防止變質(zhì)。
        器具原則：任何用于移液的器具和容器都應(yīng)各自貼上標(biāo)簽，單獨(dú)使用，以免交叉污染。
        試劑只出不入原則：測試時，從任何試劑瓶吸出的試劑，禁止再次注射回試劑瓶。 
        環(huán)境溫度對測試的影響：當(dāng)環(huán)境溫度過低時（一般低于20℃）,測試時需作必要保溫措施。