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抗DNA及組織蛋白自身抗體
抗可提取性核抗原(ENA)抗體:史密斯抗原(Sm)、核糖核蛋白(RNP)、SSA、SSB、Scl-70,Jo-1 以及PM1
抗DNA及組織蛋白自身抗體包括了抗單鏈DNA及雙鏈DNA(ssDNA及dsDNA)。抗雙鏈DNA的顯著水平被證實(shí)是診斷系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)的標(biāo)志。抗組織蛋白抗體則暗示著藥物引起的狼瘡。
除了DNA及組織蛋白,自身抗體可能還會以其他核抗原為目標(biāo)。這些核抗原被命名為可提取性核抗原,它們zui初是從細(xì)胞核的鹽溶液中所提取出來的??故访芩箍乖⊿m)是zui早被發(fā)現(xiàn)的ENA,被認(rèn)為是與SLE有著高度的關(guān)聯(lián)。隨后,其他的ENA也逐漸被發(fā)現(xiàn)。
盡管大多數(shù)的ENA都是某些疾病所特異性擁有的,但是還是有明顯的重疊存在。因此檢測靈敏度及特異性很大程度上依賴于所潛在的CTD類型。
病人血清中自身抗體的存在構(gòu)成了CTD診斷的標(biāo)準(zhǔn)。ANA子類型的區(qū)分可以與病人臨床癥狀相結(jié)合,用于鑒別CTD的類型。
間接免疫熒光法(IF)以及酶聯(lián)免疫法(ELISA)是ANA檢測的日常手法。zui初,篩查應(yīng)該由ANA-IF進(jìn)行初步的檢測。如果存在陽性結(jié)果,那就應(yīng)該根據(jù)臨床癥狀以及IF-ANA染色的結(jié)果進(jìn)行更進(jìn)一步的特異性檢測。
這些特異性ELISA可檢測單一的自身抗體,如:dsDNA抗體、SSA、SSB、RNP。
抗雙鏈DNA抗體特異性的用于SLE的診斷,其含量水平會在活性期增加。zui近發(fā)布的ACR指導(dǎo)建議需進(jìn)行雙鏈DNA抗體檢測的有:患有急性腎小球腎炎孕婦的每月檢測、患有急性腎炎的患者或者曾經(jīng)患有腎炎的孕婦的每三個月檢查、曾經(jīng)患有急性腎炎的患者的每六個月檢查。
體內(nèi)不存在抗雙鏈DNA抗體的SLE患者通常會帶有抗單鏈DNA抗體。同樣的,抗RNP抗體也是高度特異于SLE,但是該抗體僅在10~30%的SLE患者體內(nèi)出現(xiàn)。
抗SSA、抗SSB抗體通常暗示著干燥綜合征,但是同樣會在30%的出現(xiàn)有皮膚牽連的SLE患者體內(nèi)檢測到。
抗SSA抗體可以通過胎盤而可能引起胎兒的SLE疾病。同時抗SSA抗體在那些胎兒患有先天性心臟病以及新生兒狼瘡的母親體內(nèi)總是能夠被檢測到。
【檢測原理】
微孔中包被有高純度的核抗原(SS-A 60、SS-A 52、SS-B、RNP-70、Sm、RNP/Sm、ScI-70、著絲點(diǎn)B、Jo-1)。樣本中的特異性抗體會結(jié)合到微孔板的抗原上。洗板以除去非特異性的血清和血漿成分。辣根過氧酶標(biāo)記的抗人IgG可檢測已結(jié)合的病人抗體,從而形成酶聯(lián)物/抗體/抗原復(fù)合物。洗板以出去未結(jié)合的酶聯(lián)物。底物液遇到酶聯(lián)物后水解形成藍(lán)色。加入硫酸終止反應(yīng)以形成黃色終產(chǎn)物。在酶標(biāo)儀上450nm處測量黃色的強(qiáng)度,所顯示的顏色強(qiáng)度直接與樣品中特異性抗體的濃度直接成正比。
【貯存條件】
避光保存在2~8℃下
使用及儲存時應(yīng)避免將試劑暴露在高溫、陽光、以及強(qiáng)烈光照下
有效期18個月
稀釋好的洗滌液及樣品緩沖液保存在2~8℃下,30天內(nèi)穩(wěn)定
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