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PCR 芯片定義

　　實(shí)時(shí)定量 PCR 是檢測(cè)基因表達(dá)zui靈敏，zui可靠的方法。通過(guò)在試驗(yàn)過(guò)程中，實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)熒光染料的信號(hào)變化，反映樣品中的基因拷貝數(shù)。實(shí)時(shí)定量 PCR 線性范圍廣（能達(dá)到 5 個(gè)數(shù)量級(jí)），因此可以檢測(cè)同一樣品中表達(dá)量極低的基因和表達(dá)量很高的基因。但是，由于實(shí)時(shí)定量 PCR 需要制備標(biāo)準(zhǔn)曲線和同時(shí)分析內(nèi)參基因，因此，每次實(shí)驗(yàn)只能檢測(cè)少數(shù)幾個(gè)基因的表達(dá)水平，若要檢測(cè)大量基因，則工作量巨大，耗時(shí)長(zhǎng)久。

　　通過(guò)簡(jiǎn)單的，經(jīng)過(guò)優(yōu)化的實(shí)時(shí)定量 PCR 體系，如 SuperArray 的 RT 2 Profiler TM PCR 芯片，研究者可以同時(shí)研究大量基因，既可以進(jìn)行某些特別感興趣的信號(hào)通路的研究，也可以作為驗(yàn)證芯片結(jié)果的方法。

　　為了獲得理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果， PCR 芯片面臨以下挑戰(zhàn)：高特異性，高靈敏度和可重復(fù)性。高靈敏度或低檢出限，在樣品的總 RNA 量少，基因表達(dá)量低的情況下，也能檢測(cè)出目的基因。高特異性，擴(kuò)增產(chǎn)物嚴(yán)格保證基因特異性，避免非特異性產(chǎn)物，如引物二聚體的產(chǎn)生?？芍貜?fù)性，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)化的反應(yīng)體系和實(shí)驗(yàn)方法，使得多人多次重復(fù)實(shí)驗(yàn)均能獲得可靠的基因定量結(jié)果。

PCR array 輔助試劑

1 RT2 First Strand Kit

2 RT2 qPCR Master Mixes

根據(jù)實(shí)驗(yàn)實(shí)不同的儀器類型選擇相應(yīng)的 Max mixes