黃曲霉毒素測(cè)定儀
EAB1-95型黃曲霉毒素測(cè)定儀能*、定量測(cè)定樣品中黃曲霉毒素B1的含量,適用于糧食、食品、飼料、油脂、乳制品、藥物、飲料、酒等產(chǎn)品黃曲霉毒素B1的檢測(cè)。
EAB1-95型黃曲霉毒素測(cè)定儀,由試劑盒和光度計(jì)二大件組成:采用固相酶聯(lián)免疫吸附ELISA的原理,達(dá)到了快速、正確、*、定量測(cè)定黃曲霉毒素B1的效果。全過(guò)程可在1小時(shí)內(nèi)完成。操作簡(jiǎn)便、安全、可靠、精度高、數(shù)據(jù)正確的新一代產(chǎn)品。如配其他試劑盒,也可對(duì)其他毒素進(jìn)行檢測(cè)。
1)儀器準(zhǔn)備:
① 使用本儀器前,使用者應(yīng)首先了解本儀器的結(jié)構(gòu)和工作原理,以及各個(gè)操作旋鈕之功能。在未接通電源之前,應(yīng)對(duì)儀器的安全性進(jìn)行檢查,電源線的接線應(yīng)牢固,接地良好。
② 打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)。打開(kāi)樣品室蓋,取出遮塵蓋。
③ 調(diào)滿度:關(guān)閉樣品室蓋,“T.A.C”選擇旋鈕調(diào)至(T)檔,檔位旋鈕保持在“1”檔,調(diào)節(jié)“T.100”旋鈕,直至數(shù)值顯示為“T.100.0”。(放大靈敏度檔共有三檔。“1”檔zui低。其使用方法原則上是在滿足空白參比能調(diào)“100.0”滿度的情況下,盡可能采用“1”檔,以取得較好的穩(wěn)定性。若空白孔的吸光度較高時(shí)“1”檔不能滿足滿度“100.0”可逐步提位。)
④ 調(diào)零:拉開(kāi)樣品室蓋,調(diào)節(jié)“T.0”旋鈕,使數(shù)字顯示為(T)“00.0”,然后將樣品室蓋推上,使硅光電池受光 ,再次調(diào)節(jié)“T.100”旋鈕 。使數(shù)字顯示為“100.0”。保持該狀態(tài)使儀器預(yù)熱15分鐘。
2)試劑:請(qǐng)參見(jiàn)試劑盒中的說(shuō)明書(shū)操作。
3)測(cè)定:使用黃曲霉毒素測(cè)定儀在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的吸光度A值。
步驟:
① 將“T.A.C”旋鈕調(diào)至“A”檔。調(diào)節(jié)“A.0”旋鈕,使數(shù)值顯示為“A.000”。將酶標(biāo)板放入樣品室內(nèi),將*個(gè)孔對(duì)準(zhǔn)光源,關(guān)閉樣品室蓋,待數(shù)值穩(wěn)定后記錄。
打開(kāi)樣品室蓋,將第二個(gè)孔對(duì)準(zhǔn)光源,關(guān)閉室蓋。待數(shù)據(jù)穩(wěn)定后記錄。依此類推測(cè)量所有的樣品孔。
3、計(jì)算:將濃度為0,0.1,0.25,0.5,1,2ng/ml的AFB1系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液,及相對(duì)應(yīng)的吸光度A值,繪制成標(biāo)準(zhǔn)曲線。
1)將吸光度A值代入下列公式
A3-A樣 A3-A樣
LgX=(Lg1-Lg0.1) +Lg0.1= —1
A3-A2 A3-A2
A3 - 0.1ppb的標(biāo)樣
A2 - 1ppb的標(biāo)樣
A樣- 樣品
2)將計(jì)算出來(lái)的數(shù)據(jù)用計(jì)算機(jī)反log。
步驟Step:
① 按計(jì)算機(jī)上的SHIFT鍵,再按log鍵
② 輸入lgX的數(shù)值
③ 按 = 鍵
④ 得出X值
3)再將X值代入下列公式
V × D
C= X ×
m
X—樣品中AFB1稀釋后的濃度;
C —樣品AFB1含量(μg/kg);
D —樣品稀釋倍數(shù)【(提取液+稀釋液)/提取液】;
m —樣品稱重g;
V —樣品提取液體積ml(1:1甲醇水);
橫坐標(biāo)為標(biāo)準(zhǔn)液濃度的常用對(duì)數(shù)值(1gC),縱坐標(biāo)為各標(biāo)準(zhǔn)液孔A值與標(biāo)準(zhǔn)液為0ng/ml的A值的比值(A標(biāo)準(zhǔn)液/A(0ng/ml))。
以樣品孔A值與0ng/ml標(biāo)準(zhǔn)孔A比值(A樣品/A0×100)在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查對(duì)應(yīng)值,可得到相應(yīng)樣品濃度(C)的常用對(duì)數(shù)值lgC,對(duì)其求反對(duì)數(shù),可求得樣品稀釋液中AFB1濃度值C。按下列公式計(jì)算出樣品中AFB1的含量:
AFB1含量(ng/g)=C×V×D/M
式中:C:稀釋后樣品提取液中AFB1濃度(ng/ml);
V:樣品提取液(甲醇水)體積(ml);
M:樣品質(zhì)量(g);
D:樣品稀釋倍數(shù) 。
4.經(jīng)驗(yàn)計(jì)算法: