葡萄球菌A蛋白（SPA）的性質(zhì)

    葡萄球菌A蛋白（staphylococalproteinA，SPA）是一種從金黃色葡萄球菌細(xì)胞壁分離的蛋白質(zhì)。早在1940年Vevwey就發(fā)現(xiàn)在某些金黃色葡萄球菌菌株含有一種物質(zhì)，在雙向擴(kuò)散試驗(yàn)中能與正常人血清出現(xiàn)沉積現(xiàn)象，Jensen（1959）也發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象，并將其命名為A抗原。直到1963年，Lofkvist等分離了該抗原，并證明它是一種蛋白質(zhì)。為與A多糖相區(qū)別，Grov（1960）將其命名為葡萄球菌A蛋白，簡(jiǎn)稱SPA或A蛋白。由于SPA能與人及多種哺乳類動(dòng)物血清中的IgG呈非特異性結(jié)合，并保持其原有的活性，引起了廣大免疫學(xué)者的興趣，并發(fā)展成為免疫學(xué)上一種極為有用的工具，使SPA分子在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)中得到廣泛的應(yīng)用。

    （一）SPA的主要存在部位

SPA存在于大多數(shù)（90％）金黃色葡萄球菌中，而不存在于表皮葡萄球菌中；并且主要存在于血漿凝固酶陽(yáng)性菌株，而不存在于陰性菌株中。前者是致病的，后者是非致病的，但在體內(nèi)研究中尚未發(fā)現(xiàn)SPA和菌株致病性之間有任何肯定的關(guān)系。不同菌株間的SPA含量有明顯差異，以I株金黃色葡萄球菌含SPA量zui高，和細(xì)胞壁的肽聚糖呈共價(jià)結(jié)合?？苟籽趸角嗝顾赝蛔冎?/span>（methicillin-resistant strain）能產(chǎn)生分泌SPA，它較之細(xì)胞壁所含的SPA在免疫學(xué)性質(zhì)上相似，但易分離，損失少。

    （二）SPA的相對(duì)分子質(zhì)量及等電點(diǎn)

SPA為蛋白質(zhì)成分，僅含少量或不含碳水化合物，其相對(duì)分子質(zhì)量因提取方法不同而異，用脫氧核糖核酸酶消化細(xì)胞壁后超速離心或用加熱抽提法，所測(cè)相對(duì)分子質(zhì)量為12000～15000。用沉淀平衡分析和在6mol／L鳥嘌呤鹽酸中凝膠過濾，測(cè)出相對(duì)分子質(zhì)量為42000。SPA為單鏈多肽，內(nèi)含3個(gè)高度相似的Fc段結(jié)合區(qū)，每區(qū)由50個(gè)以上的氨基酸組成，不含色氨酸和半胱氨酸。其羧基末端是賴氨酸，氨基末端結(jié)構(gòu)尚未肯定。SPA黏度高于球蛋白，等電點(diǎn)（pi）為5．1，其天然結(jié)構(gòu)十分穩(wěn)定，在應(yīng)用6 mol／L鳥嘌呤鹽酸變性劑的條件下，尚能保存某些三級(jí)結(jié)構(gòu)，如將變性劑除去，則能自然矯正而恢復(fù)原有結(jié)構(gòu)。

    （三）SPA的免疫學(xué)特性

    SPA之所以引起免疫學(xué)家的重視，是因?yàn)樗哂械拿庖邔W(xué)特性。SPA具有和人及許多動(dòng)物（如豚鼠、豬、小鼠、猴等）IgG結(jié)合的能力。SPA結(jié)合部位是Fc段而不是Fab段，這種結(jié)合不會(huì)影響抗體的活性。SPA具有的結(jié)合力是雙價(jià)的，每個(gè)SPA分子可以同時(shí)結(jié)合2個(gè)IgG分子，也可一方面同IgG相結(jié)合，一方面與標(biāo)記物[如熒光素、酶（HRP、AKP和GO等）、膠體金和鐵蛋白等]相結(jié)合。還有一個(gè)饒有興趣的事實(shí)是，與SPA結(jié)合后IgG可用4mol／L鳥嘌呤鹽酸等使之解離。利用這一生物化學(xué)特性，可以將SPA交聯(lián)在葡聚糖凝膠上，對(duì)抗原或抗體蛋白質(zhì)進(jìn)行純化。SPA對(duì)IgG免疫球蛋白亞型的結(jié)合有選擇性，如SPA與人IgG亞型IgGl、IgGz和IgG4有結(jié)合力，不結(jié)合IgG3；只結(jié)合IgH2，而不結(jié)合IgHl。SPA與人及大部分哺乳動(dòng)物血清中的IgG結(jié)合，能反應(yīng)的動(dòng)物包括豚鼠、小鼠（純種）、狗、豬、猴和經(jīng)免疫的家兔等。其結(jié)合部位為免疫球蛋白的CH2和Cn3的交界處。另外，它還能與少數(shù)血清中的IgM結(jié)合。SPA還能激活和固定補(bǔ)體，激活B淋巴細(xì)胞，促使其成熟并分泌產(chǎn)生各類免疫球蛋白。

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