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色譜常見十四種使用問題的詳細(xì)解答

問：用HPLC進(jìn)行分析時(shí)保留時(shí)間有時(shí)發(fā)生漂移，有時(shí)發(fā)生快速變化，原因何在?如何解決?
　　( 答：關(guān)于漂移問題：
　　1、溫度控制不好，解決方法是采用恒溫裝置，保持柱溫恒定
　　2、流動(dòng)相發(fā)生變化，解決辦法是防止流動(dòng)相發(fā)生蒸發(fā)、反應(yīng)等
　　3、柱子未平衡好，需對(duì)柱子進(jìn)行更長(zhǎng)時(shí)間的平衡
　　關(guān)于快速變化問題
　　1、流速發(fā)生變化，解決辦法是重新設(shè)定流速，使之保持穩(wěn)定
　　2、泵中有氣泡，可通過(guò)排氣等操作將氣泡趕出。
　　3、流動(dòng)相不合適，解決辦法為改換流動(dòng)相或使流動(dòng)相在控制室內(nèi)進(jìn)行適當(dāng)混合
　　問：色質(zhì)聯(lián)用中毛細(xì)柱的選擇應(yīng)注意什么問題?
　　答：1、柱效要高
　　2、熱穩(wěn)定性好
　　化學(xué)惰性強(qiáng)
　　具體選擇應(yīng)注意
　　1、柱極性。根據(jù)分析樣品選擇不同極性的柱子進(jìn)行分析
　　2、柱子內(nèi)徑。內(nèi)徑大小決定柱容量
　　3、液膜厚度。分析樣品溫度一不一樣，對(duì)膜厚有不同要求，溫度高液膜要厚，溫度低液膜要薄
　　4、柱長(zhǎng)度。柱越長(zhǎng)，柱效越高，分離效果越好，但也存在吸附問題，柱子過(guò)長(zhǎng)，分析時(shí)間長(zhǎng)，因此要根據(jù)樣品考慮柱子長(zhǎng)度
　　5、外涂層(柱體)的選擇
　　6、另外還有儀器型號(hào)、分析對(duì)象等因素

問：液相色譜中峰出現(xiàn)拖尾或出現(xiàn)雙峰的原因是什么?
　　答：1、篩板堵塞或柱失效，解決辦法是反向沖洗柱子，替換篩板或更換柱子。
　　2、存在干擾峰，解決辦法為使用較長(zhǎng)的柱子，改換流動(dòng)相或更換選擇性好的柱子
　　( 問：從那些方面可以簡(jiǎn)單判別毛細(xì)管柱子的熱穩(wěn)定性好壞?
　　答：1、分配容量(或容量因子)K，好的柱子在高溫運(yùn)行后，分配容量K不應(yīng)有明顯的下降，否則，說(shuō)明柱子的熱穩(wěn)定性不好。
　　2、理論塔板數(shù)n，熱穩(wěn)定性好的柱子經(jīng)受高溫后，理論塔板數(shù)應(yīng)基本保持恒定
　　3、柱子的極性。熱穩(wěn)定性好的柱子，高溫前后極性變化不大，具體表現(xiàn)為保留指數(shù)I值沒有大的變化。
　　4、噪聲。熱穩(wěn)定性好的柱子在高溫下使用后，噪聲不能增加.
　　5、柱子的去活層，毛細(xì)管柱子涂固定液前內(nèi)部一般要用去活性試劑去活以增加惰性。質(zhì)量好的毛細(xì)管柱子高溫后，去活層
　　不應(yīng)該變化，表現(xiàn)在對(duì)強(qiáng)極性樣品或酸堿性樣品的吸附性不能增加。