葉綠色的測(cè)定方法步驟
測(cè)定葉綠素的主要步驟如下:
(1)過(guò)濾:
抽濾前加入碳酸鎂懸濁液防止色素分解。負(fù)壓不能超過(guò)50kPa。
(2)葉綠素的提?。?/span>
先研磨,將濾膜放置于組織研磨器中,加入4-5ml 的90%丙酮溶液,500r/min 研磨3min。破碎濾膜上浮游植物藻類細(xì)胞。
然后浸泡提?。簩⑵扑楹蟮募?xì)胞提取液轉(zhuǎn)移至15ml 離心管中,用90%丙酮溶液沖洗研磨器及研磨杵一并轉(zhuǎn)入離心管,定容至10ml?;靹蚝?℃暗處浸泡提取。浸泡時(shí)間為15min 至24h。過(guò)程中要顛倒混勻數(shù)次。
最后離心澄清:1000g 離心20min 或過(guò)濾,將上清液轉(zhuǎn)移至旋塞玻璃小瓶中。
(3)測(cè)定方法:
分光光度法,三色方程測(cè)定664nm、647nm、630nm、750nm 吸光度計(jì)算葉綠素a、b、c 葉綠素含量。單色方程測(cè)定脫鎂葉綠素a 校正后的含量。