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當(dāng)前位置:科德角國際生物醫(yī)學(xué)科技(北京)有限公司>>技術(shù)文章>>鱟試驗法的反應(yīng)機理簡介
鱟試驗法也稱為細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法,英文Bacterial Endotoxin test,系列用革蘭氏陰性菌所產(chǎn)生的內(nèi)毒素與TAL或LAL試劑發(fā)生反應(yīng),根據(jù)所形成的凝膠化反應(yīng),從而定性或定量檢測細(xì)菌內(nèi)毒素的一種體外分析方法。
有關(guān)細(xì)菌內(nèi)毒素與LAL試劑或TAL試劑的反應(yīng)機理研究,雖然在研究鱟血凝集反應(yīng)的初期,leven and Bang就已經(jīng)初步闡明了凝集反應(yīng)的機理;但進一步從分子水平上的研究工作,一直到70年代后期才逐漸被闡明。鱟試驗?zāi)磻?yīng)的機理如下圖所示:
即鱟血變形細(xì)胞裂解物中含有能被內(nèi)毒素激活的凝固系統(tǒng),主要有凝固酶原,C因子、B因子與凝固蛋白原等,內(nèi)毒素激活C因子,活化的C因子又激活B因子(C因子系),或由1,3)-β-D-葡聚糖激活G因子(G因子系)接著激活的B因子或激活的G因子,再去激活凝固酶原,使其轉(zhuǎn)變成活化的凝固酶,該酶切斷凝固蛋白原中特定位置的精氨肽鏈,形成凝固蛋白產(chǎn)生凝膠。關(guān)于G因子系能否單獨成立,目前在各國存在分歧,凝固酶除能水解凝固蛋白原使之變成凝固蛋白而發(fā)生凝固外,它還對外加的鱟三肽有去胺酶活性使硝基苯胺(pNA)游離,而發(fā)生呈色反應(yīng)。
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