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為此，盛瀚科研人員圍繞“離子色譜在制藥行業(yè)中的應用”進行了一系列實驗測定，希望制藥行業(yè)或行業(yè)外的工作人員對離子色譜的應用有更多參考和了解。

·離子色譜在原料藥及其相關制劑中的應用

原料藥，指用于生產(chǎn)各類制劑的原料，是制劑中的有效成份，由化學合成、植物提取或者生物技術所制備的各種用來作為藥用的粉末、結(jié)晶、浸膏等。原料只有加工成藥物制劑，才能成為供臨床使用的藥物，因此原料藥質(zhì)量好壞決定制劑質(zhì)量的好壞。

世界各國對于其廣泛應用的原料藥及其相關制劑都制定了嚴格的國家藥典標準和質(zhì)量控制方法，以加強藥物中有毒成分的控制，加強對藥物雜質(zhì)的定性定量研究，進一步完善藥物與有效性相關的質(zhì)量控制要求。

4.中藥材中二氧化硫的測定

硫磺熏蒸或浸泡是中藥材、飲片的傳統(tǒng)養(yǎng)護方法，它能使中藥材、飲片外觀光鮮，即使水分嚴重超標也不會霉變。但這種加工方法會導致中藥材原藥殘留大量的二氧化硫，對人體健康有一定的影響。2020版藥典規(guī)定了酸堿滴定法、氣相色譜法、離子色譜法用于檢測中藥材中二氧化硫。其中離子色譜法需使用水蒸氣蒸餾法提取中藥材中二氧化硫，將其轉(zhuǎn)化為亞硫酸根，進一步被雙氧水氧化為硫酸根后進行分析測定。

l 分析柱：SH-G-1+SH-AC-4            

l 流動相：2.0 mM Na₂CO₃+8.0 mM NaHCO₃

l 流速：1.3 mL/min

l 柱溫：35℃                  

l 抑制器：SHY-A-6

l 進樣體積：25 μL

l 前處理：稱取5~10 g供試品粗粉（準確記錄質(zhì)量，精確至0.0001 g），置于水蒸氣蒸餾裝置蒸餾，吸收液過0.22 μm濾膜進樣分析。

圖1  中藥材中二氧化硫(SO₄^2-)譜圖

5. 達肝素鈉中亞硝酸根和硫酸根離子的測定

達肝素鈉為豬黏膜的低分量肝素鈉，平均分子量4000～6000，為新一代抗血栓形成藥，具有明顯的抗血栓形成功能，尤其抗凝血第Ⅹa因子的功能很強，但抗凝作用微弱，抗凝血酶作用極微弱。達肝素鈉是由普通肝素解聚或經(jīng)酶作用而獲得，具有普通肝素所不具備的優(yōu)點。近年的研究結(jié)果表明，其療效高于普通肝素，具有使用方便，相對安全等優(yōu)點，可在院外使用。達肝素鈉常存在游離的亞硝酸根和硫酸根離子，可用離子色譜法進行定性定量分析。

（1）達肝素鈉中亞硝酸根離子

l 分析柱：SH-G-1+SH-AC-3            

l 流動相：166 mM NaAc（磷酸調(diào)節(jié)pH至4.3）

l 流速：1.0 mL/min

l 柱溫：室溫                    

l 檢測方式：直流安培法

l 施加電壓：1.0 V

l 進樣體積：100 μL

l 前處理：準確稱取固體樣品80 mg，加純凈水定容至10 mL，過0.22 μm濾膜進樣分析。

圖1  達肝素鈉中亞硝酸根離子譜圖

（2）達肝素鈉中硫酸根離子

l 分析柱：SH-G-1+SH-AC-3            

l 流動相：2.0 mM Na₂CO₃+8.0 mM NaHCO₃

l 流速：1.0 mL/min

l 柱溫：35℃                    

l 抑制器：SHY-A-6

l 進樣體積：25 μL

圖2  達肝素鈉中硫酸根離子譜圖

6. 硫酸軟骨素中硫酸根離子的測定

硫酸軟骨素（CS），是共價連接在蛋白質(zhì)上形成蛋白聚糖的一類糖胺聚糖。在醫(yī)學上主要是作為治療關節(jié)疾病的藥品，與氨基葡萄糖配合使用，具有止痛，促進軟骨再生的功效，可以從*關節(jié)問題。硫酸軟骨素廣泛分布于動物組織的細胞外基質(zhì)和細胞表面，糖鏈由交替的葡萄糖醛酸和N-乙酰半乳糖胺聚合而成，通過一個似糖鏈接區(qū)連接到核心蛋白的絲氨酸殘基上。雖然多糖的主鏈結(jié)構(gòu)并不復雜，但硫酸化程度、硫酸基多少是決定其活性大小的極為重要的指標。因此檢測硫酸軟骨素中硫酸根離子的含量，對于活性研究和臨床應用重要的意義。

l 分析柱：SH-G-1+SH-AC-4            

l 流動相：2.0 mM Na₂CO₃+8.0 mM NaHCO₃

l 流速：1.3 mL/min

l 柱溫：35℃                    

l 抑制器：SHY-A-6

l 進樣體積：25 μL

l 前處理：樣品過0.22 μm一次性針頭過濾器進樣分析。

圖1  硫酸軟骨素中硫酸根離子譜圖

7. 伊班膦酸鈉中亞磷酸根和磷酸根離子的測定

伊班膦酸鈉（IB），化學名稱為1-羥基-3-(N-甲基-N-戊胺基)亞丙基雙膦酸單鈉鹽一水合物。IB屬于第三代雙膦酸類藥物，用于治療惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移、預防骨轉(zhuǎn)移及乳腺癌骨轉(zhuǎn)移后骨骼事件的發(fā)生，并可預防和治療骨質(zhì)疏松癥，是目前適應癥*的雙膦酸鹽藥物，具有高效、低毒和使用方便等優(yōu)點。

隨著IB臨床應用的增多，有必要建立便捷、靈敏的檢測方法，為藥品質(zhì)量檢測提供技術支持。磷酸根和亞磷酸根作為伊班膦酸鈉注射液中的有關物質(zhì)，分析方法主要有容量分析法、分光光度法、高效液相色譜-示差折光檢測法、離子色譜法等。通常情況下，容量分析和分光光度法易受制劑中輔料干擾，現(xiàn)已較少應用；示差折光檢測法對離子態(tài)物質(zhì)靈敏度低，受流動相組成的波動影響較大，不適合梯度洗脫；離子色譜法因其準確、快速、選擇性好，可同時分離多組分物質(zhì)等優(yōu)點被廣泛應用。

l 分析柱：Ion Pac AG11-HC+AS11-HC            

l 流動相：KOH梯度洗脫

              0-5 min，16 mM KOH；

              5-7 min，16-25 mM KOH；

              7-17 min，25 mM KOH；

              17-20 min，25-45 mM KOH；

              20-23 min，45 mM KOH；

              23.1-28 min，25 mM KOH；

              28.1-39 min，16 mM KOH。

l 流速：1.0 mL/min

l 柱溫：35℃                    

l 抑制器：SHY-A-6

l 進樣體積：20 μL

l 前處理：

儲備液：分別準確稱取0.1048 g亞磷酸、0.1123 g伊班膦酸鈉，加超純水稀釋定容至100 mL，配制得PO₃^3-、伊班膦酸1000 mg/L儲備液。

供試品：取伊班膦酸注射液5 mL，稀釋定容至10 mL。

對照品：分別取100 μL PO₃^3-、250 μL PO₄^3-、500μL伊班膦酸儲備液(1000 mg/L)，用超純水稀釋定容至100 mL，配制得1 mg/L PO₃^3-、2.5 mg/L PO₄^3-、5 mg/L伊班膦酸對照品溶液。

圖1 對照品譜圖

圖2 供試品譜圖

• CIC-D120離子色譜儀

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