Anti-H3K27ac多克隆抗體
- 公司名稱 武漢艾美捷科技有限公司
- 品牌 BPS Bioscience
- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 代理商
- 更新時間 2025/3/7 11:28:27
- 訪問次數(shù) 38
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
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在兔體內(nèi)產(chǎn)生的針對組蛋白H3的多克隆抗體,使用KLH偶聯(lián)的合成肽在賴氨酸27(H3K27ac)處乙?;?。
作為BPS Bioscience在中國的區(qū)域總代理,艾美捷科技強烈推薦BPS Bioscience銷售產(chǎn)品Anti-H3K27ac多克隆抗體。產(chǎn)品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 詳情 |
Anti-H3K27ac多克隆抗體 | BPS-25239 | 查看 |
Anti-H3K27ac多克隆抗體:
克隆性:多克隆
宿主物種/表達系統(tǒng):兔
純化方法:親和純化
形式:水溶液
配方:含有0.05%疊氮化物和0.05% ProClin 300的PBS緩沖液
濃度:50 ?g/42 ?l
免疫原:合成肽
儲存/穩(wěn)定性
在-80°C下可保存長達2年。分裝以避免反復(fù)凍融。分裝后可在-20°C下保存至少一個月。
染色質(zhì)免疫沉淀(ChIP)實驗結(jié)果
使用針對H3K27ac的抗體(產(chǎn)品編號25239)和優(yōu)化的qPCR引物組合,在HeLa細胞中進行ChIP實驗。實驗使用了100萬細胞的剪切染色質(zhì)。抗體用量梯度為1、2、5和10 ?g/次ChIP實驗,并進行了分析。以2 ?g/IP的IgG作為陰性免疫沉淀對照。定量PCR使用了活性基因ACTB和EIF4A2的啟動子引物作為陽性對照,以及非活性基因MYT1和TSH2B的編碼區(qū)引物作為陰性對照。圖1顯示了回收率,以輸入量的百分比表示(免疫沉淀DNA與輸入DNA的相對量,經(jīng)qPCR分析后得出)。這些結(jié)果與H3K27乙?;患诨钚曰騿幼訁^(qū)域的觀察結(jié)果一致。
ChIP-seq實驗結(jié)果
使用2 ?g針對H3K27ac的抗體(產(chǎn)品編號25239),在100萬HeLaS3細胞的剪切染色質(zhì)上進行ChIP實驗。定量PCR使用了活性基因ACTB和EIF4A2的啟動子引物作為陽性對照,以及非活性基因MYT1和MB的編碼區(qū)引物作為陰性對照(圖2A)。隨后,免疫沉淀的DNA在Illumina基因組分析儀上進行分析。文庫制備、簇生成和測序均按照制造商說明進行。36 bp的標簽通過ELAND算法與人類基因組比對。圖2B顯示了沿完整X染色體的峰分布,以及圍繞ACTB和EIF4A2陽性對照基因的兩個區(qū)域的分布(圖2C和D)。
抗體滴度測定
為了測定抗體滴度,使用針對H3K27ac的抗體(產(chǎn)品編號25239)在抗原包被的孔中進行ELISA實驗,抗體進行梯度稀釋。使用的抗原是含有目標組蛋白修飾的肽段。通過繪制吸光度與抗體稀釋度的關(guān)系圖(圖3),估計抗體滴度為1:4000。
點雜交分析
使用針對H3K27ac的抗體(產(chǎn)品編號25239)進行點雜交分析,測試其與其他組蛋白修飾肽段以及未修飾的H3K27序列的交叉反應(yīng)性。將100至0.2 pmol的相應(yīng)肽段點在膜上,抗體稀釋度為1:25000。圖4顯示抗體對目標修飾具有高特異性。
Western Blot分析
使用針對H3K27ac的抗體(產(chǎn)品編號25239),對HeLa細胞的全細胞裂解物(40 ?g,泳道1)和組蛋白提取物(15 ?g,泳道2),以及1 ?g的重組組蛋白H2A、H2B、H3和H4(分別對應(yīng)泳道3、4、5和6)進行Western Blot分析。抗體在含有5%脫脂奶粉的TBS-Tween中稀釋1:1000。右側(cè)標記了目標蛋白的位置,左側(cè)顯示了分子量標記(單位:kDa)。
免疫熒光分析
HeLa細胞用針對H3K27ac的抗體(產(chǎn)品編號25239)和DAPI進行染色。細胞用4%甲醛固定10分鐘,并用含有5%正常山羊血清和1% BSA的PBS/TX-100進行封閉。細胞用H3K27ac抗體(左側(cè))在封閉液中稀釋1:500進行免疫熒光標記,隨后用與Alexa488偶聯(lián)的抗兔抗體進行二抗標記。中間圖顯示了DAPI對細胞核的染色。右側(cè)圖顯示了兩種染色的合并圖像。
應(yīng)用
ChIP/ChIP-seq(1 - 2 ?g/ChIP)
ELISA(1:100)
點雜交(1:25000)
Western Blot(1:1000)
免疫熒光(1:500)
運輸溫度:-20°C或-80°C
物種反應(yīng)性:人
備注:每次免疫沉淀的抗體優(yōu)良用量應(yīng)由終端用戶確定。建議測試1 - 5 ?g/次。
注意事項:避免反復(fù)凍融。
科學(xué)分類:抗體
監(jiān)管狀態(tài):僅限研究使用
產(chǎn)品數(shù)據(jù)庫:
BPS Bioscience是一家通過ISO 9001:2015認證的生命科學(xué)領(lǐng)域的供應(yīng)商,公司一直致力于開發(fā)藥物研發(fā)領(lǐng)域的重組蛋白酶、蛋白酶活性/抑制劑篩選試劑盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年創(chuàng)立,從創(chuàng)立至今一直致力于提供藥物研發(fā)領(lǐng)域的創(chuàng)新解決方案,以推動新的藥物發(fā)現(xiàn)a。公司主要關(guān)注的領(lǐng)域包括免疫療法、表觀遺傳學(xué)、CRISPR、細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等,主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、組蛋白去甲基化酶、組蛋白甲基化轉(zhuǎn)移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。
作為BPS Bioscience在中國的區(qū)域代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BPS Bioscience以及客戶訂制化服務(wù)。
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