F0193胎牛血清

產(chǎn)品名稱：南美烏拉圭胎牛血清

生產(chǎn)廠家：Sigma-Alldrich

產(chǎn)品貨號(hào)：F0193

產(chǎn)品規(guī)格：500ML

產(chǎn)品特點(diǎn)：

①烏拉圭來源，具有可追溯性

②無菌心臟穿刺取血

③3次0.1μm無菌過濾

④嚴(yán)格QC標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行微生物、內(nèi)毒素、血紅蛋白等多項(xiàng)檢測(cè)

⑤經(jīng)過細(xì)胞培養(yǎng)驗(yàn)證

胎牛血清的優(yōu)點(diǎn)：

1. 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：胎牛血清為細(xì)胞提供了多種必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。

2. 生長(zhǎng)因子：促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。3. 抗體：幫助細(xì)胞抵抗某些病原體的侵害。4. 降低毒性：某些培養(yǎng)基成分可能對(duì)細(xì)胞有毒，胎牛血清中的其他成分可以幫助中和或減少這些毒性。5. 促進(jìn)細(xì)胞間的相互作用：胎牛血清中的某些成分可以促進(jìn)細(xì)胞間的相互作用。

3. 如何解凍和替換胎牛血清一般是在20°C凍存，2°C到8°C之間融化。最好將大包裝根據(jù)每次需求的量分小包裝儲(chǔ)存，避免反復(fù)凍融。血清融化后常出現(xiàn)沉淀，可能是血清蛋白的凝聚造成的。這些沉淀一般不會(huì)影響血清質(zhì)量，可能對(duì)細(xì)胞的顯微觀察有一定的阻礙，可短暫離心清除。對(duì)于血清的融化，國(guó)際上比較流行的方法是三步法，以500 ML血清為例，在室溫下放置1.5 h，20°C水浴25 min，37°C 水浴35 min。秉持著“現(xiàn)用現(xiàn)配”的原則，已經(jīng)添加血清及抗生素的新鮮培養(yǎng)基，建議在一周內(nèi)用完。在遇到由于供應(yīng)、性價(jià)比、培養(yǎng)效果不佳等原因需要替換胎牛血清品牌時(shí)，或者長(zhǎng)期使用一種品牌導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)馴化狀態(tài)，培養(yǎng)效果欠佳時(shí)，如何順利地度過過渡期顯得尤為重要，可優(yōu)先嘗試同種來源的血清替換，其次是不同種血源的血清相互替換。建議嘗試比例替換方法，分2-3個(gè)階段進(jìn)行替換，逐漸降低原品牌比例，剛替換血清可能會(huì)使細(xì)胞增殖放緩，建議每個(gè)階段/替換傳代3次或以上再進(jìn)行觀察判斷。

4. 澳洲胎牛血清澳洲因其自身的草原氣候等地理優(yōu)勢(shì)，嚴(yán)格的飼養(yǎng)環(huán)境和疾病控制，是zhi名的胎牛血清產(chǎn)地。以新西蘭血源的血清為例，澳洲胎牛血清的質(zhì)量通常較好，適用范圍廣泛，可滿足常規(guī)原代細(xì)胞、干細(xì)胞、較難培養(yǎng)的傳代細(xì)胞、免疫細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞等各種細(xì)胞培養(yǎng)需求。

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胎牛血清常見問題解析：

血清沉淀是什么?血清非人工產(chǎn)品，沉淀出來系自然現(xiàn)象，沉淀主要是纖維蛋白原，其次是鹽析出。如磷酸鈣等，還有一些dan固醇和脂肪酸以及其他蛋白析出物質(zhì)等

哪些因素血清沉淀會(huì)增加？血清熱滅活、37℃培養(yǎng) 、反復(fù)凍融、溶解過程中沒有搖勻、伽馬射線照射、長(zhǎng)期存放在 2-8°C、血清加入到RPMI 1640中時(shí)、pH升高時(shí)、在培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)基的蒸發(fā)等等因素都會(huì)導(dǎo)致沉淀的增加。

沉淀不會(huì)影響其對(duì)細(xì)胞的促生長(zhǎng)作用技術(shù)人員對(duì)此問題有過深入研究證明，血清沉淀對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)沒有影響，但有一個(gè)例外：沉淀對(duì)巨噬細(xì)胞的培養(yǎng)會(huì)有一些影響。

沉淀這種現(xiàn)象發(fā)生在所有的血清中“G*品牌的胎牛血清沒有預(yù)老化,如果存放在2-8℃，血清中的各種蛋白或酯類有可能會(huì)凝聚析出,出現(xiàn)沉淀或混濁. 這種不會(huì)影響血清對(duì)對(duì)細(xì)胞的促生長(zhǎng)作用.我們建議把血清存放在 –20℃，并避免反復(fù)凍融。S*品牌胎牛血清說明書中說: “在融化過程中混濁多絮狀沉淀，這種現(xiàn)象對(duì)多數(shù)血清來說是正常的，并不影響其使用質(zhì)量。但它影響血清的外觀，影響瓶與瓶之間的一致性。

有沉淀出現(xiàn)的血清并不是污染檢測(cè)血清是否被污染比較好的方法是將血清接種到血酯板上，培養(yǎng)后看是否有菌落形成。在1000x顯微鏡下，有經(jīng)驗(yàn)的通過觀察細(xì)胞液狀態(tài)和常見細(xì)菌的外形即可鑒別，或者通過有無革蘭氏染色的細(xì)菌，也可以判斷血清是否被污染。

如何去除血清中的沉淀?如想去除這些絮狀沉淀物，可將血清分裝到無菌離心管中，以400g離心，上清液即可直接加入到培養(yǎng)液中使用。不要以過濾的方式去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)榭赡茏枞麨V膜。

血清溶解過程如何減少沉淀將血清從冷凍箱取出后，先置于2-8℃冰箱12-24小時(shí)左右使之溶解，然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是，溶解過程中必須規(guī)則地輕輕搖晃均勻。切勿將剛剛從-20℃冰箱里拿出來的血清直接放在水浴中，無論室溫的水或者37℃的水，因?yàn)樵谒≈醒逖杆偃诨?，很大的溫?-20℃到37℃，溫差為57℃)極其容易造成血清產(chǎn)生沉淀。直接放65℃水浴中更是極其殘忍的做法，是對(duì)血清的褻玩，對(duì)科學(xué)規(guī)則的粗暴踐踏!

胎牛血清凍存注意事項(xiàng)需要長(zhǎng)期保存的血清有必要儲(chǔ)存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí)刻切勿超過1個(gè)月。由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%，因而，血清在凍入低溫冰箱前，有必要預(yù)留一定體積空間，不然易發(fā)生污染或玻璃瓶?jī)隽?。大包裝的瓶裝血清凍結(jié)需采用逐漸凍結(jié)法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解。然后移入室溫，待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷悄悄搖晃均勻(小心勿形成氣泡)，使溫度與成分均一，削減沉積的發(fā)作。切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃融化，溫差大的情況下血清容易形成蛋白質(zhì)凝聚而出現(xiàn)沉積和沉淀絮狀物。