一、產(chǎn)品描述

本慢病毒濃縮試劑為5×濃縮液，可以對慢病毒顆粒進(jìn)行簡單快速的濃縮。該試劑操作簡單，僅需將5×濃縮液與慢病毒上清按比例混合并孵育一段時間，正常轉(zhuǎn)速離心，即可得到濃縮的慢病毒顆粒，回收率高達(dá)90%以上，可提高100倍病毒滴度。

二、慢病毒濃縮試劑操作步驟

1.收集細(xì)胞培養(yǎng)上清液，0.45μm濾膜過濾，去除細(xì)胞和碎片。

【注】：濾膜過濾需使用低蛋白吸附的纖維素醋酸酯或聚醚砜（PES）膜。切忌用硝酸纖維素膜（NC）。

2.將慢病毒上清液與試劑盒中的濃縮液按照體積比4:1的體積混合（上清液4份，濃縮液1份），混勻后4℃靜置，每隔30min混勻一次，混勻共進(jìn)行3次。4℃孵育2h或過夜。

【注】：延長孵育時間可以提高回收率。慢病毒顆粒在4℃可以穩(wěn)定保存數(shù)天。

3.4℃，4000g離心30min。

4.小心去除上清，不要劇烈晃動管子，一般可見白色沉淀（有時沉淀不可見）。

5.用初始體積（原上清液體積）1/10 - 1/100的DMEM或PBS重懸病毒顆粒，小心吹打均勻，重懸沉淀物。

6.重懸后的病毒以50µl/管分裝，-80℃冰箱保存。

【注】：慢病毒凍存液避免反復(fù)凍融，否則會降低病毒滴度。