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平板細胞克隆實驗

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平板細胞克隆實驗

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伊萊博生物科技(上海)有限公司,公司總部位于上海長江軟件園。2024年1月與上海大學(xué)醫(yī)學(xué)院成立聯(lián)合研究中心,主要以生命科學(xué)研究為基礎(chǔ),專注于研究成果轉(zhuǎn)化及技術(shù)服務(wù)創(chuàng)新,建立了包含腫瘤生物學(xué)、病理學(xué)、免疫學(xué)、細胞生物學(xué)、生物化學(xué)與分子生物學(xué)以及動物實驗等學(xué)科的研究服務(wù)體系,為醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的發(fā)展做出了重要貢獻。


目前已建成并投入使用的實驗室面積近2800平方米,包含基礎(chǔ)實驗平臺、組學(xué)實驗平臺以及動物實驗平臺,基本能夠滿足科研課題研究的全流程。


伊萊博生物擁有專業(yè)的技術(shù)支持和實驗操作人員團隊,核心成員來自中科院、復(fù)旦、交大、同濟等國內(nèi)重點高校及科研機構(gòu),能夠提供前沿的、完善的實驗技術(shù)咨詢與服務(wù)。


為了響應(yīng)國家大力發(fā)展基礎(chǔ)研究的號召,推動實驗科學(xué)領(lǐng)域的進步,伊萊博生物充分利用積累多年的科研資源優(yōu)勢,為廣大科研工作者提供實驗技術(shù)培訓(xùn)服務(wù),從理論和實操兩個部分,培養(yǎng)其科研思維以及解決問題的能力,為今后的科研工作奠定堅實的基礎(chǔ)。








免疫學(xué);ELISA試劑盒,抗體,生化試劑,相關(guān)試劑。原代細胞,傳代細胞,及培養(yǎng)試劑

克隆形成試驗是測定細胞增殖能力的有效方法之一,貼壁后的細胞不一定每個都能增殖和形成克隆,而形成克隆的細胞必為貼壁和有增殖活力的細胞。細胞克隆形成率表示接種細胞后貼壁的細胞成活并形成克隆的數(shù)量,可以反映細胞群體依賴性和增殖能力兩個重要性狀。

1.取對數(shù)生長期的各組細胞,分別用0.25%ydbm消化并吹打成單個細胞,并把細胞懸浮在10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液中備用。

2.將細胞懸液作梯度倍數(shù)稀釋,每組細胞分別以每皿50、100、200個細胞的梯度密度分別接種含10mL 37℃預(yù)溫培養(yǎng)液的皿中,并輕輕轉(zhuǎn)動,使細胞分散均勻。置37℃ 5%CO2及飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2——3周。

3.經(jīng)常觀察,當(dāng)培養(yǎng)皿中出現(xiàn)肉眼可見的克隆時,終止培養(yǎng)。棄去上清液,用PBS小心浸洗2次。加4%多聚甲醛固定細胞5mL固定15分鐘。然后去固定液,加適量GIMSA應(yīng)用染色液染10——30分鐘,然后用流水緩慢洗去染色液,空氣干燥。

4. 將平皿倒置并疊加一張帶網(wǎng)格的透明膠片,用肉眼直接計數(shù)克隆,或在顯微鏡(低倍鏡)計數(shù)大于10個細胞的克隆數(shù)。最后計算克隆形成率。




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