化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>試劑標(biāo)物>行業(yè)專用試劑>生化與分子生物學(xué)用試劑>20564ES Anti-GFP MagBeads(Anti-GFP免疫磁珠)
20564ES Anti-GFP MagBeads(Anti-GFP免疫磁珠)
- 公司名稱 翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 品牌 Yeasen/翌圣生物
- 型號 20564ES
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/2/7 13:50:54
- 訪問次數(shù) 257
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥 |
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產(chǎn)品描述
Anti-GFP MagBeads(Anti-GFP免疫磁珠)是一種聚合物磁性微球,由高質(zhì)量的鼠源IgG單克隆抗體與carboxyl magnetic beads通過供價(jià)偶聯(lián)制備,本產(chǎn)品具有快速的磁響應(yīng)性,超順磁性、良好的分散性、粒徑均一、極低的非特異結(jié)合和豐富的結(jié)合位點(diǎn)等特點(diǎn),可用于帶有GFP標(biāo)簽的蛋白免疫沉淀(IP)。
產(chǎn)品性質(zhì)
配體 | Anti-GFP Antibody |
粒徑 | 200 nm |
結(jié)合能力 | >0.6 mg蛋白/mL 磁珠 |
磁珠體積 | 10 mg/mL |
儲(chǔ)存緩沖液 | ddH2O |
運(yùn)輸和保存方法
冰袋運(yùn)輸。2-8℃儲(chǔ)存。避免凍存!有效期1年。
注意事項(xiàng)
為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
本產(chǎn)品僅作科研用途!
使用方法
1樣品準(zhǔn)備
樣品可以是細(xì)菌發(fā)酵液或者細(xì)胞裂解液, 樣品中不能含有顆粒不溶物,可以用0.22 μm濾膜過濾或10,000×g離心15 min。
2 磁珠預(yù)處理
2.1 用移液器輕柔吹打Anti-GFP免疫磁珠,使其充分混懸,取 25~50 µL 磁珠懸液置于1.5 mL離心管中。
2.2 加入500 µL IP Lysis/Wash Buffer并輕輕移液器混合,用移液器輕柔吹打重懸Anti-Flag免疫磁珠,接著在磁力架上靜置1 min后,吸棄上清。
2.3 重復(fù)步驟 2.2 兩次。
3樣品的結(jié)合
3.1 在預(yù)處理后的磁珠中加入蛋白樣品,置于翻轉(zhuǎn)混合儀上孵育(常溫2 h,4 ℃過夜);
3.2 將上述混合液置于磁力架上靜置1 min,然后把上清液轉(zhuǎn)移到新的離心管中備用(上清液可用于檢測Flag標(biāo)簽蛋白是否存在殘留),原離心管中剩余的即為 蛋白-磁珠復(fù)合物;
注意:結(jié)合過程中,磁珠可能會(huì)出現(xiàn)聚團(tuán)或呈片狀,屬于正常現(xiàn)象,不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
4洗滌
4.1 向步驟3.2所得的蛋白-磁珠復(fù)合物中加入 500 µL IP Lysis/Wash Buffer ,用移液器輕柔吹打重懸,接著在磁力架上靜置 1 min 后, 吸棄上清;
4.2 重復(fù)步驟4.1兩次,直至洗滌后的上清液OD280小于0.05為止;
注意:如上清液的OD280仍大于0.05,則適當(dāng)增加洗滌次數(shù)。
5蛋白洗脫
5.1 酸性洗脫(0.1 M Gly-HCl,pH 3.0)
1)加入100 μL 0.1 M Gly-HCl,pH 3.0,室溫孵育5-10 min(慢慢搖晃)。
2)分離磁珠上的磁珠并保存含有目標(biāo)抗原的上清液。
3)中和低pH,每100 μL洗脫液加入20 μL中和緩沖液(1M Tris pH8.5)。最后的溶液可以用作樣品用于變性 SDS-PAGE。
5.2 用SDS-PAGE上樣緩沖液洗脫
如需直接檢測目的蛋白,則在上述洗滌過的蛋白-磁珠復(fù)合物中加入100 μL 1×SDS-PAGE上樣緩沖液,煮沸 5 min,冷卻至室溫并在磁力架上靜置 1 min 后,取上清進(jìn)行 SDS-PAGE 檢測。
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