分子克隆和質(zhì)粒載體構建服務

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分子克隆和質(zhì)粒載體構建服務|實驗技術服務

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分子克隆的相關載體: DNA的片段的克隆需要合適的載體，載體或是質(zhì)粒，或是噬菌體，或是病毒，通常大多經(jīng)過人工改造。作為載體必須具備兩條件:-是該載體在細胞內(nèi)必須能自主復制， 即必須具備復制原點;二是該載體必須具備適合的酶切位點，且這些酶切位點不在復制原點區(qū)域內(nèi)。以上兩條，保證了載體的可繁殖性和可利用性。為了便于獲得陽隆克隆，載體上常有篩選標記，如對抗菌素的抗性，某些基因產(chǎn)物的顯色反應等。

服務要求:

1、請以郵件等形式告知我們服務的主要目的及具體要求。

2、提供外源DNA的來源及背景資料。DNA來源包括: PCR擴增產(chǎn)物; RT - PCR擴增產(chǎn)物;從其它質(zhì)粒上酶切得到的DNA的片段等。

3、提供DNA的片段的電泳照片,并請標明Marker有濃度。

4、提供載體來源與背景資料。

5、注明克隆使用的酶切位點以及是否需要平端連接等。

相關材料說明:

1、對于實驗材料中涉及病原體等危險材料不接受。

2、實驗中涉及的堿基序列請以郵件的形式發(fā)到我中心。

3、實驗中的使用載體要盡量提供背景資料: (質(zhì)粒大小， 抗性，拷貝數(shù)，多克隆位點等)如果是商品化載體，請您提供生產(chǎn)廠家及標準名稱;如果所提供載體是您自己構建的請注明大體結構情況。

4、我中心可以提供常用的如(氨芐青霉素，氯霉素，卡那霉素)以外的抗生素需您提供。

5、您自己提供的引物如果為干品，請您標注具體的OD數(shù)，如果是液體態(tài)，請您標明濃度。

6、可以用甘油菌和穿刺菌形式郵寄菌體。

(同時提供相應的質(zhì)粒) ;如果提供質(zhì)粒，則質(zhì)粒的量建議在4ug以上;如果提供的是PCR產(chǎn)物，則PCR產(chǎn)物量建議好在5u以上(并附上電泳圖)

7、用于提取RNA/DNA的材料要新鮮。采樣時應首先在液氮中速凍，保存在- 80度的冰箱中，使用干冰運輸。

結果提供:

1、相關的實驗說明和相關的酶切圖片。

2、測序的結果。

3、構建好的載體和菌液各-份。

4、如有鑒定的客戶提供PCR鑒定圖片。