IEF Optimizer 等電聚焦條件決定儀

品牌： Visual Protein

貨號(hào)： IOR01

您是否對(duì)于二維電泳的再現(xiàn)性低弱而感到困擾呢?

二維電泳救星 "IEF Optimizer"

直接提供二維電泳樣本zui適化實(shí)驗(yàn)參數(shù)！

在進(jìn)行 IEF 等電點(diǎn)電泳之前，每次進(jìn)行樣品前處理時(shí)所得到鹽含量不同，就算是相同的樣品分別經(jīng)由相同處理步驟所得到鹽含量高低也有所差異，換言之，即使找到樣品的 IEF條件，也不一定能夠適合于不同批處理但來源物種相同的樣品。

現(xiàn) 在，IEF Optimier 可以解決此困擾。IEF Optimizer 結(jié)合了鹽度檢測(cè)儀IEF Salt Meter 與在線分析軟件 Voltage-Hour Calculator，可針對(duì)每一次進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的樣品進(jìn)行鹽含量測(cè)量，并透過Voltage-Hour Calculator計(jì)算出*電泳條件。所以就算是相同樣品而有不同鹽含量也可以提供 IEF 條件，有助于增加實(shí)驗(yàn)再現(xiàn)性。

一、產(chǎn)品特點(diǎn)：

1. 預(yù)測(cè)*IEF等電聚焦電泳條件，增加實(shí)驗(yàn)成功率

2. 增加二維膠體電泳實(shí)驗(yàn)再現(xiàn)性

3. 適用于市面上各種 IEF 等電點(diǎn)電泳系統(tǒng)

二、實(shí)驗(yàn)步驟 (簡要說明)：

1. 將250-400 μl 準(zhǔn)備好的二維膠體電泳樣品加入IEF Salt Meter 的測(cè)量孔，待儀器讀值慢慢上升到讀值穩(wěn)定之后，記錄鹽含量讀值與溫度讀值，並將回收的樣品保存于冰上【此樣品可取適當(dāng)量后直接進(jìn)行二維電泳】。

2. 使用網(wǎng)絡(luò)瀏覽器鏈接至 Visual Protein *的 Voltage-Hour Calculator 頁面，將各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)參數(shù)與IEF Salt Meter測(cè)得的鹽度與溫度讀值填入字段，系統(tǒng)將運(yùn)算出優(yōu)化的IEF 等電點(diǎn)電泳條件 (total voltage hour)。如果樣品狀況不佳，系統(tǒng)則會(huì)直接告知”DO NOT PERFORM IEF”。

三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖：

圖1：

以豬肝為樣品，進(jìn)行二維膠體電泳，*維電泳范圍從 pH3 到 pH10，而第二維電泳以 12.5 % SDS-PAGE 進(jìn)行分離。左圖之*維電泳條件依據(jù) IEF 等電點(diǎn)儀器原廠操作手冊(cè)提供條件進(jìn)行；右圖之*維條件，則依據(jù) IEF Salt Meter 建議的電泳條件所進(jìn)行。以肉眼即可判斷出右圖影像所顯示的蛋白質(zhì)點(diǎn)較多且分離效果較佳。

四、Q&A

Q1：IEF Optimizer 如何校正?

A1：使用前先以裝有 ddH2O 的洗滌瓶沖洗鹽含量測(cè)量孔及偵測(cè)器，并

取拭鏡紙將其擦干，再取出與樣品同體積的 Rehydration Buffer 注入測(cè)量孔中，待儀器讀值慢慢上升到穩(wěn)定后，記錄儀器鹽含量讀值 (SB) 與溫度讀值 (TB) 作為檢測(cè)背景值。

Q2：IEF Optimizer 可連續(xù)測(cè)量不同樣品嗎?

A2: 可以，但每次測(cè)量前需先以ddH2O清洗。

IEF Optimizer 等電聚焦條件決定儀  生物試劑

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