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產品名稱:AtT20,小鼠垂體瘤細胞
規(guī)格:5×1000000cells/瓶
產品運輸方式:干冰或者活體細胞運輸,保證細胞運輸中的存活率。
特點:細胞代數為3-5代左右。
包裝:內層無菌自封袋、防壓泡沫盒、外層防壓保溫氣泡袋、說明書。
產品用途:僅用于科研實驗
價格:電詢/詢價。
上海昱都生物提供 ATCC 細胞|細胞系|細胞株|腫瘤細胞|細胞|貼壁細胞|懸浮細胞|,細胞庫管理規(guī)范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養(yǎng)條件,售后服務周到。
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細胞的凍存和復蘇:
一、原理
在不加任何條件下直接凍存細胞時,細胞內和外環(huán)境中的水都會形成冰晶,能導致細胞內發(fā)生機械損傷、電解質升高、滲透壓改變、脫水、PH改變、蛋白變性等,能引起細胞死亡。如向培養(yǎng)液加入保護劑,可使冰點降低。在緩慢的凍結條件下,能使細胞內水份在凍結前透出細胞。貯存在-130℃以下的低溫中能減少冰晶的形成。
細胞復蘇時速度要快,使之迅速通過細胞zui易受損的-5~0℃,細胞仍能生長,活力受損不大。
目前常用的保護劑為二甲亞砜(DMSO)和甘油,它們對細胞無毒性,分子量小,溶解度大,易穿透細胞。
二、操作步驟
(一)凍存
1、消化細胞(同實驗二),將細胞懸液收集至離心管中。
2、1000rpm離心10分鐘,棄上清液。3、沉淀加含保護液的培養(yǎng),計數,調整至5×106/ml左右。
4、將懸液分至凍存管中,每管1 ml。
5、將凍存管口封嚴。如用安瓿瓶則火焰封口,封口一定要嚴,否則復蘇時易出現爆裂。
6、貼上標簽,寫明細胞種類,凍存日期。凍存管外拴一金屬重物和一細繩。
7、按下列順序降溫:室溫→4℃(20分鐘)→冰箱冷凍室(30分鐘)→低溫冰箱(-30℃ 1小時)→氣態(tài)氮(30分鐘)→液氮。
注意:操作時應小心,以免液氮凍傷。液氮定期檢查,隨時補充,不能揮發(fā)干凈,一般30立升的液氮能用1~1.5月。
(二)復蘇
1、準備一個茶缸或1000ml的燒壞,內裝2/3杯37℃的溫水。
2、從液氮中取出凍存管、迅速置于溫水中并不斷攪動。使凍存管中的凍存物在1分鐘之內融化。
3、打開凍存管,將細胞懸液吸到離心管中。
4、1000rpm離心10分鐘,棄去上清液。
5、沉淀加10ml培養(yǎng)液,吹打均勻,再離心10分鐘,棄上清液。
6、加適當培養(yǎng)基后將細胞轉移至培養(yǎng)瓶中,37℃培養(yǎng),第二天觀察生長情況。
三、試劑和器材
器材:液氮罐、凍存管(塑料螺口凍存管或安瓿瓶)、離心管、吸管、離心機等
試劑:0.25%胰酶、培養(yǎng)基、含保護劑的培養(yǎng)基(即凍存液)
附:凍存液配制:
培養(yǎng)基加入甘油或DSMO,使其終濃度達5—20%。保護劑的種類和用量視不同細胞而不同。配好后4℃下保存。
其他優(yōu)質細胞供應:
人乳腺上皮細胞HMT-3522 S1人乳腺癌細胞AU565
人乳腺癌細胞BT-20人乳腺癌細胞BT474
人乳腺癌細胞BT483人乳腺癌細胞BT549
人乳腺癌細胞CAL-120人乳腺癌細胞CAL-148
人乳腺癌細胞CAL-51人乳腺癌細胞CAL-85-1
人乳腺癌細胞COLO-824人乳腺癌細胞EFM-19
人乳腺癌細胞EFM-192A人乳腺癌細胞EFM-192B
人乳腺癌細胞EFM-192C人乳腺癌細胞EVSA-T
人乳腺癌細胞HCC1143人乳腺癌細胞HCC1187
人乳腺癌細胞HCC1395人乳腺癌細胞HCC1419
人乳腺癌細胞HCC1569人乳腺癌細胞HCC1806
人乳腺癌細胞HCC1954人乳腺癌細胞HCC70
人乳腺癌細胞HDQ-P1人乳腺癌細胞Hs578T
人乳腺癌細胞JIMT-1人乳腺癌細胞KPL-4
人乳腺癌細胞MCF-7人乳腺癌細胞MDA-MB-157
人乳腺癌細胞MDA-MB-231人乳腺癌細胞MDA-MB-361
人乳腺癌細胞MDA-MB-415人乳腺癌細胞MDA-MB-436
人乳腺癌細胞MDA-MB-453人乳腺癌細胞MDA-MB-468
人乳腺癌細胞MFM-223人乳腺癌細胞MRK-nu-1
人乳腺癌細胞SUM 102PT人乳腺癌細胞SUM 1315M02
人乳腺癌細胞SUM 149PT人乳腺癌細胞SUM 159PT
人乳腺癌細胞SUM 190PT人乳腺癌細胞SUM 44PE
人乳腺癌細胞SUM 52PE人乳腺癌細胞T47D
人乳腺癌細胞UACC893人乳腺癌細胞VP229
人乳腺癌細胞VP267人乳腺癌細胞VP303
人乳腺癌細胞ZR-75-1人乳腺癌細胞UACC-893
人乳腺導管癌HCC1008人乳腺導管癌細胞MDA-MB-134VI
人乳腺導管癌細胞MDA-MB-175VII人乳腺導管癌細胞MDA-MB-435S
人乳腺導管癌細胞ZR-75-30人乳腺導管瘤細胞UACC812
人乳腺上皮細胞DU4475人乳腺腺癌細胞CAMA-1
人乳腺腺癌細胞HCC1428人乳腺腺癌細胞SK-BR-3
人乳腺原發(fā)性導管癌HCC1500人乳腺原發(fā)性導管癌HCC1599
人乳腺原發(fā)性導管癌HCC202人乳腺原發(fā)性導管癌HCC38
人乳腺原發(fā)性導管癌細胞HCC1937人正常乳腺上皮細胞MCF10A