ifeAct活細(xì)胞F-Actin熒光標(biāo)記質(zhì)粒

ibidi活細(xì)胞F-Actin熒光標(biāo)記質(zhì)粒LifeAct

      LifeAct是一個(gè)來(lái)源于酵母菌蛋白的17個(gè)氨基酸組成的多肽，可以對(duì)活細(xì)胞或固定細(xì)胞的F-Actin染色。與GFP-actin和其他的actin綁定蛋白相比，LifeAct的zui大優(yōu)勢(shì)在于無(wú)論體內(nèi)還是體外都不影響actin動(dòng)力、作為一個(gè)新型actin marker，它*的特性使之成為今天用的F-Actin marker。

     ibidi熒光標(biāo)記質(zhì)粒LifeAct轉(zhuǎn)染細(xì)胞之后，通過(guò)熒光marker tagGFP2或TagRFP使F-actin可視化。質(zhì)粒對(duì)于多種很多類型的易轉(zhuǎn)染細(xì)胞是很好的選擇。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系能維持actin的長(zhǎng)時(shí)間染色。

* Original LifeAct publication in Nature Methods:
Riedl J, et al. Lifeact – a versatile marker for the visualization of F-actin. Nature Methods 5, 605-607 (2008)

 技術(shù)優(yōu)勢(shì)

• 活細(xì)胞中F-Actin的可視化。得到細(xì)胞骨架和動(dòng)力學(xué)的*圖像。

• 不會(huì)影響Actin的功能和動(dòng)力學(xué)。

• *的信噪比。

• 在細(xì)胞系中可以穩(wěn)定表達(dá)。 

 應(yīng)用： 

   1. 細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)

       無(wú)毒性actin可視化

       熒光染色

  2.  細(xì)胞骨架動(dòng)力學(xué)研究

      細(xì)胞生物進(jìn)程中actin動(dòng)力學(xué)研究

      活細(xì)胞成像和顯微觀察

對(duì)于大多數(shù)的細(xì)胞，CMV啟動(dòng)子是很好的選擇，因?yàn)樗梢砸餖ifeAct的大量表達(dá)。但是如果使用的是敏感細(xì)胞，如神經(jīng)元細(xì)胞，胚胎干細(xì)胞等，建議選擇CAG啟動(dòng)子，因?yàn)樗鼪](méi)有病毒性來(lái)源，不會(huì)干擾細(xì)胞的免疫功能。

LifeAct 病毒載體

LifeAct病毒載體可以轉(zhuǎn)染難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞，轉(zhuǎn)染效率非常高，在原代細(xì)胞（如神經(jīng)元）中轉(zhuǎn)染效率也可以達(dá)到*。通過(guò)熒光marker TagGFP2 或TagRFP對(duì)F-Actin染色。

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