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小分子抗體包括：Fab(由完整的輕鏈和Fd構(gòu)成),Fv(由VH和VL構(gòu)成),ScFv(單鏈抗體,VH和VL之間由一連接肽連接而成),單域抗體(僅由VH組成),zui小識別單位(MRU,由一個CDR組成)以及超變區(qū)多肽、雙鏈抗體、三鏈抗體、微型抗體等幾種類型.小分子抗體的優(yōu)點是比較明顯的：

1. 制備方法較其他基因工程抗體簡單.

2.免疫原性要比原來的McAb弱得多.如果將改形抗體構(gòu)建成小分子抗體,更有可能消除其免疫原性.

3. 由于分子量小,小分子抗體更容易通過血管壁,穿透實體瘤,有利于腫瘤的治療.

4. 由于沒有Fc段,不能與非靶細(xì)胞的Fc受體結(jié)合,更能集中到達(dá)腫瘤部位,同時由于沒有Fc調(diào)節(jié)IgG的分解代謝,在體內(nèi)半壽期短,周轉(zhuǎn)快,有利于放射免疫成像檢查腫瘤.

5. 分子小,能與分布于病毒表面凹槽的抗原結(jié)合,有利于病毒性疾病的治療.

6. 在小分子抗體基因的3端接上適當(dāng)?shù)拿富蚧蚨舅氐鞍谆?即可大量產(chǎn)生酶連抗體或免疫毒素.

7. 在大腸桿菌中表達(dá),可發(fā)酵生產(chǎn)抗體.從而降低成本,使抗體治療得以普及.

在各種小分子抗體中,單域抗體(VH)和zui小識別單位(MRU)顯然不含有完整的抗原結(jié)合位點,因而作為抗體分子其特異性和親合力較低.而具有完整抗原結(jié)合位點的Fab、Fv及ScFv是目前小分子抗體研究的重點

抗體的鑒定：
1） 抗體的效價鑒定：不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管 凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴(kuò)散 試驗來鑒定。
2）抗體的特異性鑒定：抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力。抗體的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以 交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時的濃度,并按 公式計算交叉反應(yīng)率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
3）親和力：是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗 體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol?？贵w親和力的 測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。 

抗體實驗操作秘籍：
一、抗體是一種寶貴的資源，必須conserved-i.e.，使用盡可能少的，不浪費，并保持冷。
二、抗體蛋白和必須冷藏（冷凍，冰，或冷凍）在不使用的時候。
三、較稀的抗體，不穩(wěn)定的。因此，在未經(jīng)稀釋的濃縮形式存儲的抗體。
四、公司供應(yīng)抗體一般也供給指示存儲和處理。閱讀并遵照指示。
五、抗體工作時新鮮稀釋。不要稀釋你的抗體染色直到你準(zhǔn)備好開始孵化使工作方案。
六、反復(fù)凍融殺死抗體。一旦你已經(jīng)解凍的抗體溶液，然后將它存儲在4℃。

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