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抗體(antibody)：機(jī)體在抗原物質(zhì)刺激下,由B細(xì)胞分化成的漿細(xì)胞所產(chǎn)生的、可與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)的免疫球蛋白.因?yàn)閦ui初有人用電泳證明血清中抗體活性在γ球蛋白部分,故曾把抗體統(tǒng)稱為兩種(γ)球蛋白.后來(lái)證明,抗體并不都在γ區(qū)；而且位于γ區(qū)的球蛋白,也不一定都具有抗體活性.1964年,世界衛(wèi)生組織舉行專門會(huì)議,將具有抗體活性以及與抗體相關(guān)的球蛋白統(tǒng)稱為免疫球蛋白(Ig).如骨髓瘤蛋白,巨球蛋白血癥、冷球蛋白血癥等患者血清中存在的異常免疫球蛋白以及“正常人”天然存在的免疫球蛋白亞單位等.因而免疫球蛋白是結(jié)構(gòu)及化學(xué)的概念,而抗體是生物學(xué)及功能的概念.可以說(shuō),所有抗體都是免疫球蛋白,但并非所有免疫球蛋白都是抗體.

抗體的鑒定：
1） 抗體的效價(jià)鑒定：不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管 凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散 試驗(yàn)來(lái)鑒定。
2）抗體的特異性鑒定：抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力?？贵w的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以 交叉反應(yīng)率來(lái)表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按 公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無(wú)窮大時(shí),表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
3）親和力：是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗 體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫(kù)侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol?？贵w親和力的 測(cè)定對(duì)抗體的篩選,確定抗體的用途,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。 

抗體實(shí)驗(yàn)操作秘籍：
一、抗體是一種寶貴的資源，必須conserved-i.e.，使用盡可能少的，不浪費(fèi)，并保持冷。
二、抗體蛋白和必須冷藏（冷凍，冰，或冷凍）在不使用的時(shí)候。
三、較稀的抗體，不穩(wěn)定的。因此，在未經(jīng)稀釋的濃縮形式存儲(chǔ)的抗體。
四、公司供應(yīng)抗體一般也供給指示存儲(chǔ)和處理。閱讀并遵照指示。
五、抗體工作時(shí)新鮮稀釋。不要稀釋你的抗體染色直到你準(zhǔn)備好開(kāi)始孵化使工作方案。
六、反復(fù)凍融殺死抗體。一旦你已經(jīng)解凍的抗體溶液，然后將它存儲(chǔ)在4℃。

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